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細胞冷凍保存注意事項:
1)冷凍保存的細胞應(yīng)在生長良好且存活率高的狀態(tài),約為80-90%密度。
(Ana-1細胞信息:懸浮細胞 來源:通派細胞庫 培養(yǎng)基、血清:90% RIMP1640、10% 胎牛血清)
2)冷凍前檢測細胞是否仍保有其*性質(zhì),例如hybridoma 應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。
在健康細胞中,TRAP-1是代謝的重要調(diào)節(jié)蛋白,【人KATO III細胞 來源:通派細胞庫 人胃癌細胞】并且已顯示出在調(diào)節(jié)線粒體能量生產(chǎn)中發(fā)揮的重要作用。在腫瘤細胞的線粒體中,TRAP-1是過量的。研究創(chuàng)造了TRAP-1基因敲除小鼠,利用其來進行藥物Gamitrinib(其可靶定腫瘤細胞線粒體中的蛋白質(zhì))的研究。
TRAP-1是熱休克90(HSP90)蛋白家族的一成員,【人NCI-H1395細胞 來源:通派細胞庫 人肺腺癌細胞】腫瘤利用HSP90蛋白如TRAP-1,以幫助在治療下生存。在腫瘤中,TRAP-1的缺失是有重大后果的,會觸發(fā)包括代謝問題的災(zāi)難性缺陷,終導(dǎo)致腫瘤細胞死亡。
然而,一開始就缺少TRAP-1的小鼠在子宮內(nèi)有三周時間來補償此蛋白質(zhì)的缺失。【人NCI-H661細胞 來源:通派細胞庫 人大細胞肺癌細胞】研究人員發(fā)現(xiàn),在他們的基因敲除小鼠中,TRAP-1的缺失會導(dǎo)致線粒體蛋白錯誤折疊,然后觸發(fā)代償性反應(yīng),導(dǎo)致細胞消耗更多的氧氣和代謝更多的糖。
這將導(dǎo)致基因敲除小鼠線粒體產(chǎn)生失調(diào)水平的ATP。【人MOLT-4細胞 來源:通派細胞庫 人急性T淋巴母細胞白血病細胞】線粒體活性的增加實際上會適度刺激氧化應(yīng)激(自由基損傷)和相關(guān)的DNA損傷。雖然DNA損傷似乎不利于長壽養(yǎng)生,但低程度DNA損傷實際上減少了細胞的增殖,減慢生長速度,使細胞的自然修復(fù)機制生效。
總之研究發(fā)現(xiàn)TRAP-1基因敲除小鼠表現(xiàn)出較少的與年齡相關(guān)的病癥包括肥胖,【人MOLT-3細胞 來源:通派細胞庫 人急性T淋巴母細胞白血病細胞】炎癥組織變性和自發(fā)形成的腫瘤等。
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