細(xì)胞：CCD-1064SK細(xì)胞
中文名稱：人皮膚成纖維細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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通過(guò)克隆獲得胚胎干細(xì)胞
我們這些分段分化細(xì)胞在再生醫(yī)學(xué)和移植醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用開辟了道路。但有批評(píng)者認(rèn)為該研究需要破壞一個(gè)人類胚胎，雖然只是很小的胚胎，但也是不符合倫理的。
科學(xué)家已經(jīng)克隆出羊、牛以及其它物種，但在克隆人上還面臨著很大困難。去年先進(jìn)細(xì)胞技術(shù)公司稱他們已經(jīng)克隆出一個(gè)認(rèn)了胚胎，但該胚胎沒(méi)有長(zhǎng)到可作為人類干細(xì)胞來(lái)源的大小。
這次實(shí)驗(yàn)成功的秘密可能在于研究人員在“核移植”過(guò)程中除去人卵細(xì)胞核的方法十分“溫和”。接下來(lái)，研究人員將取自卵丘細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去除了細(xì)胞核的luanzi中。
刺激重組的luanzi開始分裂后，研究小組令卵子發(fā)育一周以到達(dá)胚泡階段，此時(shí)胚胎變成了一團(tuán)中空的細(xì)胞球。然后研究人員分離出細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)，這些物質(zhì)最終會(huì)發(fā)育為胎兒。
這些細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)，可以分化為胚胎干細(xì)胞，胚胎干細(xì)胞進(jìn)而可以分化為機(jī)體內(nèi)的任何細(xì)胞類型。例如，此次研究小組培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞系分化為骨、未成熟的腦細(xì)胞。
這項(xiàng)研究是一次重大突破。但同時(shí)他也指出了一個(gè)可能存在的不足。由于luanzi和卵丘細(xì)胞是來(lái)自同一個(gè)捐獻(xiàn)者，因此研究人員無(wú)法完_全證明細(xì)胞是從插入的卵丘細(xì)胞核發(fā)育而來(lái)的。
