細胞:HLE細胞
中文名稱:人肝癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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加速哺乳動物細胞基因研究的新技術
雖然數(shù)十年的遺傳學研究已揭露了不少攸關構成生物之細胞的信息。由于人類及其它哺乳動物細胞的技術限制,精密復雜的遺傳實驗通常僅可能以諸如發(fā)面酵母菌、果蠅及線蟲類蠕蟲等`樣板`生物進行。
這些生物中的基本發(fā)現(xiàn),往后可能適用于人類細胞,不過即使到那時候,過程也是艱辛費力的。
研究人員正致力于改變上述態(tài)勢。攸關于哺乳動物細胞中直接進行遺傳分析的新技術報告。
該技術就諸多生物醫(yī)學的應用而言,具有大大簡化發(fā)現(xiàn)基因及操縱基因的潛力。該技術能節(jié)省每基因數(shù)個月的研究工作。
研究人員研發(fā)出一種令他們能于老鼠細胞中,以鎖定或任意目標的方式,關閉任何基因(或基因組合體)的簡便策略。以此關閉(或間接開啟)基因的能耐,研究人員能達成若干事情。
細胞有何變化,他們能推斷特定基因的功能。此外藉由任意關閉基因,研究人員能選取那些展現(xiàn),諸如對癌腫治療具改善反應等,引人矚目之新屬性的細胞。后者無成見的處理方式,是確認供癌腫新療法或治療其它疾病作為潛在標的基因,很誘人的方法。