細胞:BT-474細胞
中文名稱:人乳腺導(dǎo)管瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
血小板的壽命由Bcl-xL決定
血小板是血液細胞的一個片段,也是一個非典型細胞,因為其不具有細胞核。
雖不具有細胞核,但是發(fā)現(xiàn),血小板內(nèi)部其實也有一個“定時zhadan”,已預(yù)先決定了血小板的壽命。
服用化療藥的病人特別需要注射血小板,以彌補凝血功能的缺失,因為這些抗癌藥會影響骨髓制造血小板的質(zhì)量。
還有一個尚未理清的難題,那些受贈的血小板必需在室溫下貯存,若在冷藏溫度下貯放,將引發(fā)接受者的免疫反應(yīng),血小板將很快地被視為外來物,最后全部被清除。
血小板貯放在室溫會很快就喪失活性,也會有微生物污染等問題。以人類為例,體內(nèi)的血小板壽命只有短短不到十天,而抽出后的血小板存放期則低于五天。
為了更了解血小板的生命期限,研究人員使用致突變劑來篩選產(chǎn)生低量血小板的小鼠,結(jié)果發(fā)現(xiàn)Bcl-xL缺陷鼠的血小板含量極低。
在Bcl-xL缺陷鼠的研究模式中,研究人員起先懷疑,缺乏Bcl-xL蛋白的小鼠其骨髓可能無法制造血小板,但后來發(fā)現(xiàn)這個推論是錯誤的, Bcl-xL的主要功能是維持血小板的壽命,就像它在其它細胞的功能一樣。
研究人員發(fā)現(xiàn)Bcl-xL會迫使促血小板死亡的Bak蛋白zisha,以維持血小板的生命,而當Bcl-xL被降解后,血小板才會走向自然凋亡的境地。
遺傳缺陷或藥物治療導(dǎo)致Bcl-xL的活性缺乏,間接導(dǎo)致血小板的壽命縮短,使病人的凝血機制受到影響,但若將Bak蛋白的活性消除,就能恢復(fù)這個缺陷,這也是為何Bak缺陷小鼠活得比較久的原因。
除了了解血小板的壽命是由Bcl-xL來決定外,目前研究人員也準備用BH3類似物的抗癌藥,將目標蛋白Bcl-xL的表現(xiàn)量減少,希望藉此能看到腫瘤細胞也走入細胞自然凋亡之路。