細(xì)胞：H1299細(xì)胞
中文名稱：人肺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；)
揭示干細(xì)胞分化為胰島β-細(xì)胞的調(diào)控機(jī)制
研究人員分析了胰腺干細(xì)胞向β-細(xì)胞分化過(guò)程中的微小核糖核酸變化規(guī)律，發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)胰腺干細(xì)胞向β-細(xì)胞分化中的關(guān)鍵通路，從轉(zhuǎn)錄水平上揭示了胰島素(insulin)分泌細(xì)胞的調(diào)控機(jī)制。
干細(xì)胞是機(jī)體發(fā)育過(guò)程中保留在機(jī)體各組織器官、一類具有自我復(fù)制能力的多潛能細(xì)胞，是組織工程和基因工程重要的種子細(xì)胞。
干細(xì)胞移植現(xiàn)已成為治療糖尿病的一種臨床新技術(shù)，利用具有較強(qiáng)增殖能力的胰腺干細(xì)胞離體大量增殖和分化為分泌胰島素的β-細(xì)胞是解決胰島移植過(guò)程中供體來(lái)源缺乏和免疫排斥問(wèn)題的可行途徑之一。
此次通過(guò)構(gòu)建雞胰腺干細(xì)胞系，并研究調(diào)控胰腺干細(xì)胞分化的microRNA，通過(guò)對(duì)特異microRNA的靶基因預(yù)測(cè)，從54個(gè)靶基因中驗(yàn)證3個(gè)靶基因作為microRNA-21調(diào)控對(duì)象參與胰腺干細(xì)胞向β-細(xì)胞定向分化并促進(jìn)胰島素分泌。
該研究成果不僅揭示了microRNA-21在胰腺發(fā)育中的作用，也為今后胰腺干細(xì)胞的研究提供理論依據(jù)。
