細(xì)胞:KP-N-NS細(xì)胞
中文名稱:人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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在成熟機(jī)體中發(fā)現(xiàn)的干細(xì)胞能轉(zhuǎn)化為機(jī)體中每種類型的單一組織,制造出目前所發(fā)現(xiàn)的最重要細(xì)胞。
到目前為止認(rèn)為只有來自早期胚胎的干細(xì)胞才具有這樣的能力。如果這項發(fā)現(xiàn)獲證實,那么它將意味著來自自身的細(xì)胞有一天能轉(zhuǎn)化為所有類型的、能夠匹配的移植組織,甚至器官。
如果是這樣的話,將沒必要采取治療性克隆——克隆人類以從胚胎中獲得能匹配的干細(xì)胞。
也不需要通過遺傳工程來改變胚胎干細(xì)胞(ESC)來創(chuàng)造一種“全能”的細(xì)胞,避免引發(fā)免疫排斥。這樣萬能成熟干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)也將引起關(guān)于胚胎干細(xì)胞研究是否正當(dāng)?shù)臓幷摗?br />
這些細(xì)胞在成人的骨髓中發(fā)現(xiàn)。這些證實了這些被命名為多樣成熟原始細(xì)胞(MAPC)的細(xì)胞具有與ESC相同的特性。
至少有兩個實驗室宣稱他們在小鼠中發(fā)現(xiàn)了相似的細(xì)胞,他們在皮膚,肌肉和人類骨髓中發(fā)現(xiàn)了它們。
在一系列階段中從小鼠,大鼠和人類中提取了MAPC。不帶有某種表面標(biāo)志,或是不能在某種條件下生長的細(xì)胞被逐漸去除,保留了有功能的MAPC。