細胞:C127細胞
中文名稱:小鼠乳腺腫瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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干細胞可以轉(zhuǎn)變?yōu)槿魏晤愋偷募毎诎┌Y治療中又是一個令人擔憂的問題。人們認為,惡性腫瘤中的干細胞能幫助癌癥抵抗治療。
在此之前,人們只在快速生長的侵襲性腫瘤中鑒定到干細胞。在小鼠模型中發(fā)現(xiàn),緩慢生長的腫瘤也擁有令人頭疼的干細胞。而這些低級別癌癥干細胞對抗癌藥物很不敏感,
將這些癌癥干細胞與健康干細胞進行了比較,發(fā)現(xiàn)了它們抵抗藥物治療的機制,并由此提出了新的治療策略。“需要加大藥物劑量或者使用不同的藥物,以確保殺死這些癌癥干細胞,建立了NF1型低級別腦瘤的小鼠模型。在小鼠模型中鑒定了癌癥干細胞,并證明這些細胞移植到正常小鼠中能夠形成腫瘤。
據(jù)統(tǒng)計,每2500個嬰兒就有一個患有NF1。這種疾病會引起一系列問題,包括腦部腫瘤、視力下降、學習困難、行為障礙、心臟缺陷和骨骼畸形。NF1患兒最常見的腦部腫瘤是視神經(jīng)膠質(zhì)瘤,治療這種腫瘤往往需要使用抑制細胞生長通路的藥物。
這些藥物需要用十倍的劑量才能殺死低級別癌癥干細胞。研究表明,與大腦中的健康干細胞相比,癌癥干細胞生成了更多的Abcg1蛋白。
這些蛋白能幫助細胞在壓力條件下存活。Abcg1蛋白阻斷了一個細胞內(nèi)部信號,使癌癥干細胞對治療不敏感,如果能找到使這個蛋白失活的藥物,殺死癌癥干細胞就會更容易。這項研究使用的是NF1視神經(jīng)膠質(zhì)瘤的小鼠模型。
這一發(fā)現(xiàn)同樣適用于其他腦部腫瘤。干細胞還沒有分化成為特化細胞,它們很容易就能激活新基因啟動新程序,幫助細胞在癌癥治療中生存下去;