細胞:TF-1細胞
中文名稱:人紅系白血病細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:1640+10%FBS+2.5ng/ml GM-CSF(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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在調節造血干細胞是如何再生(復制)中發揮關鍵作用的蛋白質。這一發現有助更好地理解這一蛋白質如何控制造血干細胞的生長和再生,并可能幫助找到更有效治療多種血液系統疾病和癌癥的方法。
造血干細胞(HSC)是造血細胞,具有自我更新和產生血液系統中所有類型細胞的能力。目前鮮為人知的是,造血干細胞移植達到人類骨髓后的再生(復制)過程。
研究發現細胞表面蛋白--蛋白酪氨_酸磷酸酶-Sigma(PTP-Sigma)調節造血干細胞移植中的關鍵過程即造血干細胞再生,造血干細胞再生過程是關于造血干細胞怎么開始生長和在移植后如何生成健康的血細胞。
很多小鼠和人類造血干細胞生成(表達)PTP-Sigma。PTP-Sigma基因缺失的小鼠,造血干細胞移植到小鼠中后再生能力明顯增加。
在補充研究中,不表達PTP-Sigma的人類血液造血干細胞導致HSC植入到移植免疫缺陷小鼠后的再生能力增長15倍。綜上說述,這些研究表明,PTP-Sigma抑制正常HSC再生的能力,靶向阻斷PTP-Sigma能基本上改善移植后小鼠和人體內HSC的再生能力。
表明PTP-Sigma通過抑制蛋白RAC1來調節HSC再生功能,RAC1是公知的在移植后促進HSC再生的蛋白。
這些發現具有巨大的治療潛能,因為我們已經確定造血干細胞的新受體PTP-Sigma,那么就可專門靶向作用以有力地提高患者接受移植后造血干細胞的再生。這種方法還可潛在地加速接受化療和/或輻射治療患者的血液恢復。