細胞名稱：H4-II-E-C3 大鼠肝癌細胞
培養條件：DMEM +20% horse serum +5% FBS
形 態：貼壁；上皮細胞樣
背 景：在糖皮質激素、胰島素或cAMP衍生物的誘導下可以產生*氨基轉移酶；可被逆轉錄病毒感染；可產生白蛋白、轉鐵蛋白、*原；在AxC大鼠中可以成瘤。
H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 )“一代”指從細胞接種到分離再培養的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增3～6次。細胞傳代后，一般經過三個階段：游離期、指數增生期和停止期。常用細胞分裂指數表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數／100個細胞。一般細胞分裂指數介于0.2％～0.5％，腫瘤細胞可達3～5％。接種2～3天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數增生期(對數生長期)，適宜進行各種試驗。
formazan結晶的生成量僅與活H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 )數目成正比（死細胞中琥珀酸脫氫酶消失，不能將MTT還原）。還原生成的formazan結晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸鈉（pH 4.7）的MTT溶解液中溶解，利用酶標儀測定490 nm處的光密度OD值，以反映出活細胞數目。也可以用DMSO來溶解。MTT粉末和溶液保存時都需要避光，用鋁箔紙包好就可以。實驗的時候一般關閉超凈臺上的日光燈來避光，覺得這樣比較好。
1.接種：用含10％胎小牛血清得培養液配成單個細胞懸液，以每孔1000－10000個接種到96孔板，每孔體積200ul.
2.H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 )培養：同一般培養條件，培養3－5天（可根據試驗目的和要求決定培養時間）。
3.呈色：培養3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS 配)20ul.
繼續孵育4小時，終止培養，小心吸棄孔內培養上清液，對于懸浮需要離心后再吸棄孔內培養上清液。每孔加150ul DMSO，振蕩10分鐘，使結晶物充分融解。
4.比色：選擇490nm波長，在酶聯免疫監測儀上測定各孔光吸收值，記錄結果，以時間為橫坐標，吸光值為縱坐標繪制H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 )生長曲線。
