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NCTC clone 929 L cell, L-929, derivative of Strain

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所  在  地上海市

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更新時間:2016-11-28 11:33:19瀏覽次數:275次

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產品簡介

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維描述:(1)所有細胞株購自ATCC;
(2) 公司可提供新鮮或凍存細胞株;
(3) 細胞株數量約 5×105/瓶;
(4) 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

詳細介紹

細胞名稱:NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]     小鼠成纖維細胞

組織來源:皮下結締組織;疏松結締組織及脂肪

培養條件:MEM +10% FBS

形       態:貼壁;成纖維細胞樣

背       景:1948年3月建立了NCTC clone 929(小鼠結締組織),細胞系L的克隆。細胞系L是zui早建立的連續培養細胞系之一,而clone 929是zui早的克隆株。從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的皮下網眼狀空隙和脂肪組織中建立了親本細胞系L。第95代的細胞系L使用毛細管法分離單細胞建立了clone929。檢測發現鼠痘病毒陰性。

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維“一代”指從細胞接種到分離再培養的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經過三個階段:游離期、指數增生期和停止期。常用細胞分裂指數表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數/100個細胞。一般細胞分裂指數介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%。接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數增生期(對數生長期),適宜進行各種試驗。

formazan結晶的生成量僅與活NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維數目成正比(死細胞中琥珀酸脫氫酶消失,不能將MTT還原)。還原生成的formazan結晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸鈉(pH 4.7)的MTT溶解液中溶解,利用酶標儀測定490 nm處的光密度OD值,以反映出活細胞數目。也可以用DMSO來溶解。MTT粉末和溶液保存時都需要避光,用鋁箔紙包好就可以。實驗的時候一般關閉超凈臺上的日光燈來避光,覺得這樣比較好。

1.接種:用含10%胎小牛血清得培養液配成單個細胞懸液,以每孔1000-10000個接種到96孔板,每孔體積200ul.

2.NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維培養:同一般培養條件,培養3-5天(可根據試驗目的和要求決定培養時間)。

3.呈色:培養3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS 配)20ul.

繼續孵育4小時,終止培養,小心吸棄孔內培養上清液,對于懸浮需要離心后再吸棄孔內培養上清液。每孔加150ul DMSO,振蕩10分鐘,使結晶物充分融解。

4.比色:選擇490nm波長,在酶聯免疫監測儀上測定各孔光吸收值,記錄結果,以時間為橫坐標,吸光值為縱坐標繪制NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維生長曲線。

KP-N-NS人腎上腺神經母細胞瘤細胞(腦轉移)

KU812人外周血嗜堿性白血病細胞

KURAMOCHI人卵巢癌細胞

kyse-140人食管癌細胞

Kyse450人食管癌細胞

KYSE-510人食管癌細胞

L78人肺腺鱗癌細胞

LAX人肺腺癌

LECPα-1人肺癌細胞

Li-7人肝癌細胞

lncap人前列腺癌細胞

LNCaP clone FGC人前列腺癌細胞

LoVo人結腸癌細胞

 

關鍵詞:酶標儀

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