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如何縮小ELISA試劑盒的實驗誤差

閱讀:616發布時間:2017-9-19

如何縮小ELISA試劑盒的實驗誤差

ELISA試劑盒查驗技師應具有從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。
能嫻熟操作實驗儀器、器械,具有一定總結和剖析疑問的才華,對實驗中出現的意外情況能及時妥善處理。
怎么減小ELISA實驗中的過失呢?要從天然要素(試劑安穩性、準確率、儀器精密度)和人為要素(操作者)兩個方面下手:
運用校對過的微量移液器,打掃天然過失。移液器準確與否對定量查看尤為首要。
值得改進的本地,重復實驗判定樹立后才華改進,比如洗板次數的掌握等。
加樣要準確、迅速。化學理論標明,生成物的量與反應物的量成正有關。
評估試劑的實用性。
試劑的安穩與否,對準確率的凹凸到頭首要。
在試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品重復比照實驗,判定試劑符合懇求后方可運用。
操作前仔細閱讀說明書。
嚴厲按照說明書懇求進行規范化操作。
ELISA試劑盒不一樣批號的試劑不可混用。
加樣不準確,酶生成物的量不能判定,直接影響顯色效果。
顯色的深淺及A值的測定與參與顯色劑和中止液的量有關,所以加樣應慎重。
懇求在一定時間內加樣完畢的實驗,如果加樣緩慢,便出現過失,而且試劑長時間顯露在外,特別室溫過高時,保存期會縮短甚至失效。
顯色時間過短,參與中止液反應中止后,底物聯絡物的量過少,易出現假陰性。
超越顯色懇求時間后顯色,應判為假陽性,這或許與試劑自身有關。
洗板不*,酶聯絡物本底顯色會出現假陽性。
洗刷液要新鮮,現用現配,陳舊的洗刷液會出現本底增高現象,也或許出現假陽性。
嚴控反應時間。
反應時間過長,酶失活;反應時間過短,酶聯絡物不能與血清中的微生物抗原抗體充分聯絡,生成物構造懈怠不健壯,簡略洗掉,都或許構成假陰性。
嚴厲掌握顯色時間。
加顯色劑后當即顯色,不可報陽性,這或許是本底顯色的效果。
ELISA試劑盒留心試劑保存期,過保存期的試劑不能運用。


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