多克隆抗體的制備方法
多克隆抗體（polyclonal antibody, pAb）是一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物，可刺激機體多個B細胞克隆產生針對多種抗原表位的不同抗體，所獲得的免疫血清實際上是含有多種抗體的混合物。多克隆抗體的制備步驟主要包括以下幾個步驟：
一、用于免疫的動物
作免疫用的動物有哺乳類和禽類，主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等，實驗室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動物種類的選擇主要根據抗原的生物學特性和所要獲得抗血清數量，如一般制備抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因動物反應良好，而且能夠提供足夠數量的血清，用于免疫的動物應適齡，健壯，無感染性疾患，為雄性，此外還需十分注意動物的飼養，以消除動物的個體差異以及在免疫過程中死亡的影響。若用兔，用純種新西蘭兔，一組三只，兔的體重以2～3kg為宜。
二、免疫途徑
免疫途徑多種多樣，如靜脈內、腹腔內、肌肉內、皮內、皮下、淋巴結內注射等，一般常用皮下或背部多點皮內注射。途徑的選擇決定于抗原的生物學特性和理化特性，如激素、酶、毒素等生物學活性抗原，一般不宜采用靜脈注射。
三、佐劑
由于不同個體對同一抗原的反應性不同，而且不同抗原產生免疫反應的能力也有強有弱，因此，在注射抗原的同時，加入能增強抗原的抗原性物質，以刺激機體產生較強的免疫反應，這種物質稱為免疫佐劑。佐劑除了延長抗原在體內的存留時間，增加抗原刺激作用外，更主要的是，它能刺激網狀內皮系統，使參與免疫反應的免疫活性細胞增多，促進T細胞和B細胞的相互作用，從而增強機體對抗原的細胞免疫和抗體的產生。常用的佐劑是福氏佐劑，其成分通常是羊毛脂1份、石臘油5份，羊毛脂與石臘油的比例，視需要可調整為1：2～9（V/V），這是不*福氏佐劑，在每毫升不*佐劑加入1～20mg卡介苗就成為*佐劑。
四、抗血清的采集與保存
羊等較大動物以頸靜脈、動脈取血，鼠等小動物取血參閱相關資料。收集的血液置于室溫下1h左右，凝固后，取血清，分裝，4℃冰箱保存。
五、抗血清質量的評價
在免疫期間，不僅各個不同的動物，而且同一動物在不同的時間內抗血清效價、特異性、親和力等都可能發生變化，因而必須經常地采血測試。只有在對抗血清的效價、特異性、親和力等方面作*的評價后，才可使用所取得的抗血清。
