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上海澤葉生物科技有限公司
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閱讀:1812發布時間:2016-12-12
INTERFERin™-HTS
--polyplus新型轉染試劑
產品優勢:
》 適用于siRNA的高通量轉染
》 具有高重復性的結果
》 10 ~50 nM siRNA可達沉默效率
》 高性價比——每孔所用轉染試劑較少,實驗花費少
》 可進行正向、反向和批量操作,與血清和抗生素兼容
》 貯存方便:試劑為水溶液,4度可保存一年
INTERFERin™-HTS是新一代siRNA轉染試劑,特別針對高通量應用而研發,利用較少的試劑即可達到高基因沉默效率、高重復性結果和*的細胞活性。INTERFERin™-HTS 性價比高、操作簡便、與血清和抗生素兼容,可在96孔板和384孔板進行正向、反向和批量操作。
高基因沉默效率、低細胞毒性
使用INTERFERin™-HTS轉染10 nM PLK1-siRNA,進行細胞死亡誘導的表型分析,實驗結果表明該基因沉默能夠誘導90%以上的細胞死亡(圖1)。同時,INTERFERin™-HTS轉染不帶目的基因的siRNA 的實驗表明該轉染試劑的細胞毒性很小(89% ± 7%的細胞活性)。
圖1. 在384孔板中INTERFERin™-HTS將siRNA轉染到 Hela細胞,的誘導細胞死亡
誘導細胞死亡的siRNA (PLK1, 0.05Ul) 反向轉染Hela細胞, 陰性對照為不帶目的基因siRNA (0.05uL),轉染后72小時,通過熒光顯微鏡檢測細胞活性。
高重復性結果
INTERFERin™-HTS在不同水平的高重復性結果:
不同孔間 ? 每個樣本進行三個復孔實驗,結果顯示各樣本的復孔間差異極小,可取三復孔間任一數據作為實驗結果(圖1)
不同實驗間 ?利用同一批次的INTERFERin™-HTS進行三個單獨的轉染實驗,顯示出相同的沉默效率(圖2)
不同批次間 ?利用三個不同批次的INTERFERin™-HTS進行轉染顯示出高度一致的結果(圖3)
圖2. 96孔板中不同實驗間的重復性結果
在3個不同的實驗中,用INTERFERin™-HTS將10 nM GL3Luc siRNA轉染到能夠穩定表達熒光素酶基因的A549細胞,以0.05 μL的INTERFERin™-HTS做陰性對照。轉染后48小時檢測熒光素酶表達。
圖3. 96孔板中不同批次間的重復性結果
用3個不同批次的INTERFERin™-HTS將10 nM GL3Luc siRNA轉染到能夠穩定表達熒光素酶基因的A549細胞, 0.05 μL的INTERFERin™-HTS做陰性對照。轉染后48小時檢測熒光素酶表達。
高基因沉默效率
用INTERFERin™-HTS轉染內源性的lamin A/C siRNA,其基因沉默效率高于目前市場上的另外三個常規轉染試劑。
圖4. 與其他同類試劑比較, INTERFERin™-HTS轉染siRNA 的沉默效率更高
在96孔板中, 用10 nM lamin A/C siRNA反向轉染Hela細胞, 24小時后通過分支DNA分析檢測lamin A/C的表達,用GAPDH作對照。
*的性價比
與其它同類試劑比較,使用較少量的INTERFERin™-HTS即可獲得基因表達的高沉默率;同規格條件下,該試劑可轉染的培養板數至少為其它試劑的2倍。
表1. 96孔板中每孔所需試劑體積(INTERFERin™-HTS和其它同類試劑)和1.5 mL試劑所能轉染的板數,實驗采用siRNA的反向轉染。
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