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當前位置:江蘇菲亞生物科技有限公司>>技術文章>>江蘇菲亞為您推薦確定毒性水平和消除培養污染的實驗步驟
1.
在無抗生素的培養基中消化、計數和稀釋細胞,稀釋到常規細胞傳代的濃度。
2.
分散細胞懸液到多孔培養板中,或幾個小培養瓶中。在一個濃度梯度范圍內,把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如,兩性霉素B推薦下列濃度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。
3.
每天觀測細胞毒性指標,如脫落,出現空泡,匯合度下降和變圓。
4.
確定抗生素毒性水平后,使用低于毒性濃度2~3倍濃度的抗生素的培養液培養細胞2~3代。
5.
在無抗生素的培養基中培養細胞一代。
6.
重復步驟4。
7.
在無抗生素的培養基中培養4~6代,確定污染是否以已被消除。
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