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Pierce™ 蛋白 L 瓊脂糖

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Pierce™ 蛋白 L 瓊脂糖

詳細(xì)介紹

Thermo Scientific NAb 蛋白 L 離心柱便于對(duì)各種樣品類型中的抗體進(jìn)行快速、小規(guī)模親和純化。每個(gè)柱包含 5 mL 固定化蛋白樹脂，可從 2-10 mL 血清或其他樣品中快速純化 5-65 mg IgG。純化的 IgG 實(shí)際量取決于樣品類型和使用的特定離心柱。

Pierce 蛋白 L 瓊脂糖包含已共價(jià)固定至高質(zhì)量交聯(lián)的 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 上的重組蛋白 L。該特殊種類的樹脂可提供通用的色譜特點(diǎn)組合，用于獲得高得率的目標(biāo)免疫球蛋白和對(duì)目標(biāo)免疫球蛋白進(jìn)行高純度純化。瓊脂糖微珠的物理和化學(xué)特性適用于多種親和純化系統(tǒng)。

Pierce 蛋白 L 瓊脂糖的特點(diǎn)：

?蛋白 L – 固定化蛋白 L 適用于選擇性純化具有 κ 輕鏈的人和小鼠抗體
? 瓊脂糖樹脂 – 支持物為 6% 交聯(lián)的微珠化瓊脂糖 (CL-6B)，這是蛋白親和純化方法的樹脂
? 惰性且穩(wěn)定 – *的生產(chǎn)方法通過(guò)不帶電荷的抗浸出性共價(jià)鍵固定蛋白 L，因此非特異性結(jié)合較低且能夠多次使用而不降低得率
? 標(biāo)準(zhǔn)容量 – Pierce 蛋白 L 瓊脂糖包含正常上樣量的固定化蛋白 L，提供5至10 mg 人 IgG/mL 樹脂的結(jié)合容量

應(yīng)用：
? 純化與蛋白 A 或蛋白 G 瓊脂糖結(jié)合能力較差的單克隆和多克隆抗體
? 從添加牛血清的培養(yǎng)物上清液中純化單克隆抗體
? 蛋白 L 免疫沉淀和免疫共沉淀試驗(yàn)
? 純化 ScFv 和含 κ 輕鏈的 Fab 片段

蛋白 L 是一種源自大消化鏈球菌這種細(xì)菌的免疫球蛋白結(jié)合蛋白 (36kDa)，但現(xiàn)可通過(guò)重組法在大腸桿菌中生產(chǎn)。與主要通過(guò)免疫球蛋白 Fc 區(qū)（例如：重鏈）結(jié)合的蛋白 A 和蛋白 G 不同，蛋白 L 通過(guò)與輕鏈反應(yīng)來(lái)結(jié)合免疫球蛋白。由于結(jié)合反應(yīng)無(wú)需依靠重鏈的任何部分參與，因此與蛋白 A 和 G 相比，蛋白 L 能夠結(jié)合更廣泛的免疫球蛋白類型。蛋白 L 可與免疫球蛋白的所有代表類型相結(jié)合，包括 IgG、IgM、IgA、IgE 和 IgD。單鏈可變片段 (ScFv) 和 Fab 片段也可與蛋白 L 結(jié)合。

雖然蛋白 L 能夠廣泛結(jié)合多種 Ig 類型，但它并不是通用的免疫球蛋白結(jié)合蛋白。蛋白 L 僅能與含有 κ 輕鏈（即 VL 結(jié)構(gòu)域的 κ 鏈）的免疫球蛋白結(jié)合。人和小鼠的免疫球蛋白以 κ 輕鏈為主。其他免疫球蛋白則以 λ 輕鏈為主。此外，蛋白 L 僅能有效結(jié)合某些亞型的 κ 輕鏈。例如，它能夠結(jié)合人類的 VkI、VkIII 和 VkIV 亞型，但無(wú)法與 VkII 亞型結(jié)合。小鼠免疫球蛋白的結(jié)合局限于具有 VkI 輕鏈的蛋白。

鑒于這些特定的有效結(jié)合要求，固定化蛋白 L 的主要應(yīng)用是從腹水或培養(yǎng)物上清液中純化已知具有 κ 輕鏈的單克隆抗體。蛋白 L 對(duì)于純化培養(yǎng)物上清液中含有 VLk 的單克隆抗體非常有效，因?yàn)樗粫?huì)結(jié)合存在于培養(yǎng)基血清補(bǔ)充液中的牛免疫球蛋白。此外，蛋白 L 不會(huì)干擾抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)，使其可用于免疫沉淀試驗(yàn)，即使使用 IgM 也是如此。

Pierce 蛋白 L 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯(lián)化學(xué)方法制備而成，與傳統(tǒng)配體固定方法相比具有多種優(yōu)勢(shì)。AminoLink 固定后，瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過(guò)簡(jiǎn)單的酰胺鍵結(jié)合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同，AminoLink 方法不引入任何新的化學(xué)基團(tuán)，從而避免了可能導(dǎo)致的非特異性結(jié)合，并且形成基本不可逆的穩(wěn)定結(jié)合。所得的高結(jié)合容量樹脂在多輪抗體純化之后仍然能保留功能性固定化蛋白 L。

Pierce 蛋白 L 瓊脂糖是一種多功能親和樹脂，用于純化包含特定 κ 輕鏈的哺乳動(dòng)物 IgG 同種型。蛋白 L 特別適用于分離小鼠 IgG VkI 以及人 IgG VkI、VkIII 和 VkIV 的單克隆抗體。

交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 的特性：
?支持 pH 值穩(wěn)定性：2 至 14（短期）；3 至 13（長(zhǎng)期）
? 平均粒徑：45 至 165 微米
? 排阻極限：10,000至4,000,000 道爾頓
?體積流速：約1 mL/分鐘（對(duì)于1 cm 直徑柱）
?線性速度：30 cm/h
? 壓力：低于 25psi (1.5 bar)；定義為樹脂可承受的跨色譜柱壓降（注：液相色譜裝置的指示表壓可能測(cè)量的是總系統(tǒng)壓力，而不是跨色譜柱壓降。）

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? 使用抗體結(jié)合蛋白進(jìn)行抗體純化

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Pierce™ 蛋白 L 色譜純化柱，5 mL

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

關(guān)鍵詞：色譜柱