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Y-PER™ Plus 可透析酵母菌蛋白質(zhì)提取試劑

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產(chǎn)品型號Thermo Scientific

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更新時間：2023-05-12 12:01:19瀏覽次數(shù)：178次

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產(chǎn)品簡介

Y-PER™ Plus 可透析酵母菌蛋白質(zhì)提取試劑

詳細(xì)介紹

Thermo Scientific Y-PER-Plus 可透析酵母菌蛋白質(zhì)提取試劑可有效裂解酵母菌和細(xì)菌細(xì)胞，進(jìn)而提取并溶解蛋白進(jìn)行分析。

Y-PER Plus 可透析酵母菌蛋白質(zhì)提取試劑的特點：

•為室溫儲存而設(shè)計的穩(wěn)定配方
• 只需 20 分鐘無干預(yù)孵育，即可獲得蛋白質(zhì)提取物
•無需嚴(yán)格的機械破碎或長時間酶處理
• 基于 Tris 的緩沖液具有非常低的離子強度并且不包含氯化鈉
• 簡單配方不含還原劑或螯合劑
• 可透析配方，可將提取的蛋白交換到下游技術(shù)所需的任何緩沖液中
• 與 Thermo Scientific Pierce BCA 和考馬斯 Plus 蛋白檢測兼容

產(chǎn)品詳情（使用建議）：
•新鮮細(xì)胞和冷凍細(xì)胞：Y-PER-Plus 試劑能夠從新鮮收獲和冷凍細(xì)胞中同等地提取蛋白質(zhì)
• 細(xì)胞密度和菌株變化：生物體成長率、成長溫度和培養(yǎng)基成分的差異影響從給定培養(yǎng)容量中采集細(xì)胞的數(shù)量。因此，含有關(guān)用于給定細(xì)胞團(tuán)（濕細(xì)胞糊）重量的Y-PER-Plus 試劑量的幾條建議。
•畢赤酵母：為實現(xiàn)裂解在如YEPD的富培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞，必須在對數(shù)生長期間采集細(xì)胞。為強化固定相細(xì)胞裂解，在裂解之前，直接將 DTT 或 TCEP-HCl 添加（分別達(dá)到 0.1 M 和 20 至 50 mM 的最終濃度）至 Y-PER-Plus 試劑中，以釋放更多的可溶蛋白質(zhì)。為獲得結(jié)果，每 1 克細(xì)胞團(tuán)使用 2.5 至 5.0 mL Y-PER-Plus 試劑；按比例相應(yīng)增加或減少。添加還原劑的另一種替代方法是添加蛋白酶抑制劑并在 45°C 下孵育。
•釀酒酵母：為獲得結(jié)果，在對數(shù)期采集細(xì)胞。為增加固定相細(xì)胞得率，在提取之前直接將 DTT 或 TCEP·HCl 添加（分別達(dá)到 0.1 M 和 20 至 50 mM 的最終濃度）至 Y-PER-Plus 試劑中。無論富培養(yǎng)基或合成培養(yǎng)基，效率結(jié)果沒有差異。為獲得結(jié)果，每 1 克細(xì)胞團(tuán)使用 2.5 至 5.0 mL Y-PER Plus 試劑；按比例相應(yīng)增加或減少。
•粟酒裂殖酵母：為獲得結(jié)果，請使用原始 Y-PER 試劑（產(chǎn)品編號 78990）從粟酒裂殖酵母中提取蛋白質(zhì)。
•枯草芽孢桿菌：Y-PER-Plus 試劑不能從枯草芽孢桿菌孢子中提取蛋白質(zhì)。當(dāng)使用能夠形成孢子的菌株時，在對數(shù)期采集細(xì)胞。對于不能形成孢子的菌株，可在采集前讓細(xì)胞成長至飽和態(tài)。每 1 g 細(xì)胞團(tuán)使用 2.5 至 5.0 mL Y-PER-Plus 試劑；按比例相應(yīng)增加或減少。
•大腸桿菌：每 1 g 細(xì)胞團(tuán)使用 2.5 至 5.0 mL Y-PER-Plus 試劑；按比例相應(yīng)增加或減少。
•酶活性：由于所有蛋白在結(jié)構(gòu)、可溶性和穩(wěn)定性方面有差異，在有Y-PER-Plus試劑情況下，一種特定的蛋白可能不能保持的活性。例如，原始 Y-PER 試劑可有效測定 β-半乳糖苷酶活性，但 Y-PER-Plus 試劑會降低其動力學(xué)。Y-PER-Plus 試劑與 S 轉(zhuǎn)移酶 (GST) 和 His 標(biāo)簽蛋白的標(biāo)準(zhǔn)親和純化方案兼容。

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