BL21 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品標(biāo)簽：

BL21；pGEX；pMAL；BL21 (DE3)；Rosetta (DE3)；羧芐；卡那霉素；鏈霉素；

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產(chǎn)品組分：

菌株描述

BL21菌株是線開發(fā)的原核表達(dá)用的大腸桿菌菌株，適用于轉(zhuǎn)化和非T7載體的常規(guī)蛋白表達(dá)，主要用于非毒性蛋白的表達(dá)。該菌株不含T7 RNA聚合酶基因，因此，不可用于T7啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的蛋白表達(dá)（如pET系列表達(dá)載體）；但含大腸桿菌RNA聚合酶基因，可以用于tac或trc等利用大腸桿菌RNA聚合酶的原核標(biāo)系統(tǒng)的表達(dá)（如pGEX，pMAL表達(dá)載體）。該菌株缺乏lon蛋白酶和外膜蛋白酶ompT的基因，這兩種酶的缺失降低了外源重組蛋白在菌體內(nèi)的降解，從而增加了蛋白表達(dá)量。對(duì)噬菌體T1（fhuA2）具有抗性。

BL21菌株基因型：E. coli B F-dcm ompT hsdS(rB-mB-) gal [malB+]K-12(λS)

產(chǎn)品描述

本品是大腸桿菌BL21菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的感受態(tài)細(xì)胞，可用于DNA的熱激轉(zhuǎn)化。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)107 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存幾個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。

注意事項(xiàng)

1）   感受態(tài)細(xì)胞必須用干冰運(yùn)輸。感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在-80℃保存，不可反復(fù)凍融且放置時(shí)間過長(zhǎng)，否則會(huì)減低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。

2）   在冰上融化感受態(tài)細(xì)胞。

3）   進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時(shí)，需在相應(yīng)溫度及無菌條件下進(jìn)行。

4）   為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功，可保留部分連接反應(yīng)液以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到低。

5）   產(chǎn)品包裝內(nèi)含質(zhì)粒pUC19 DNA(10pg/μl)，供對(duì)照實(shí)驗(yàn)用。

6）   為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)下進(jìn)行】

【注意】：

a）涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整。若預(yù)計(jì)的克隆較多，可直接吸取轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；若預(yù)計(jì)的克隆較少，則同上離心（5,000 rpm，1min）后留取適量培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于一個(gè)平板中。

b）新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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BL21化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 

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