小鼠Cerberus蛋白(CER)ELISA檢測試劑盒用于標記ELISA試劑盒里抗體或抗抗體的酶須具有下列特性:
1、有高度的活性和敏感性;
2、在室溫下穩定;
3、反應產物易于顯現;
4、能商品化生產。
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實驗原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
小鼠Cerberus蛋白(CER)ELISA檢測試劑盒標本的采集及保存
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過了夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.細胞培養物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
標本的稀釋原則:
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內,檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。zui后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應再乘以“N”。
小鼠Cerberus蛋白(CER)ELISA檢測試劑盒操作步驟
實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
小鼠Cerberus蛋白(CER)ELISA檢測試劑盒Thionin acetate 硫堇醋酸鹽 1g 子科ZIKER
Thiosalicylic acid 硫代水楊酸 25g 子科ZIKER
Thorin 吐啉 5g 子科ZIKER
Tetracycline hydrochloride 鹽酸四環素 100g 子科ZIKER
Tetracycline hydrochloride, 50mg/ml solution sterile 鹽酸四環素溶液 10ml 子科ZIKER
Tetradecanoic acid 肉豆蔻酸(十四酸) 250g 子科ZIKER
Tetradecanol 肉豆蔻醇 100g 子科ZIKER
n-Tetradecyl-beta-D-maltopyranoside 正十四烷基-beta-D-吡喃麥牙糖苷 500mg 子科ZIKER
Tetradecyl trimethyl ammonium bromide 十四烷基*基溴化銨 50g 子科ZIKER
Tetradecyl trimethyl ammonium bromide 十四烷基*基溴化銨 250g 子科ZIKER
Tetradecyl trimethyl ammonium bromide 十四烷基*基溴化銨 50g 子科ZIKER
Tetradecyl trimethyl ammonium bromide 十四烷基*基溴化銨 500g 子科ZIKER
Tetradecyl trimethyl ammonium chloride 十四烷基*基氯化銨 50g 子科ZIKER
Tetradecyl trimethyl ammonium chloride 十四烷基*基氯化銨 250g 子科ZIKER
Tetraethylammonium bromide 四乙基溴化銨 500g 子科ZIKER
Tetraethylammonium chloride hydrate 四乙基氯化銨 500g 子科ZIKER
Tetraethylammonium hydroxide 四乙基氫氧化銨 (25% 溶液) 500ml 子科ZIKER
Tetramethylammonium bromide 四甲基溴化銨 25g 子科ZIKER
2,2,6,6-Tetramethylpiperidine 1-oxyl 2,2,6,6-四甲基哌啶-氮-氧化物 100g 子科ZIKER
Tetraheptylammonium bromide 四庚基溴化銨 5g 子科ZIKER
1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene 四氫萘 500ml 子科ZIKER
Tetramethylammonium bromide 四甲基溴化銨 (溴化四甲銨) 25g 子科ZIKER
Tetramethylammonium chloride 四甲基氯化銨 100g 子科ZIKER
Tetramethylammonium chloride 四甲基氯化銨 500g 子科ZIKER
Tetramethylammonium chloride 四甲基氯化銨 25g 子科ZIKER
Tetramethylammonium chloride 四甲基氯化銨 100g 子科ZIKER
Tetramethylammonium chloride 四甲基氯化銨 500g 子科ZIKER
Tetramethylammonium hydroxide solution (25%) 四甲基氫氧化銨 (25% 溶液) 100ml 子科ZIKER
Tetramethylene sulfone 環丁砜 250ml 子科ZIKER
N,N,N’,N’-Tetramethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride 四甲基對苯二胺鹽酸鹽 5g 子科ZIKER
N,N,N’,N’-Tetramethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride 四甲基對苯二胺鹽酸鹽 25g 子科ZIKER
Tetramisole hydrochloride 四咪唑鹽酸 100g 子科ZIKER
Tetrapropylammonium hydroxide 25% solution 四丙基氫氧化銨25% 溶液 250ml 子科ZIKER