豬單核細胞增多性李斯特菌素O（LLO）ELISA試劑盒
英文名稱：Porcine listeriolysin O,LLO ELISA Kit
貨號：ZK-P6503
規(guī)格： 96T/48T
品牌：子科生物ZIKER
品牌：子科生物ZIKER,美國R&D,美國immonoway,美國sciencell,德國IBL
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豬單核細胞增多性李斯特菌素O（LLO）ELISA試劑盒

血清樣本采集和檢測注意事項：
  1、血清標本可按常規(guī)方法采集，應注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。
  2、 血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應。如在冰箱中保存過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。
  3、一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作，也可加入適當防腐劑。

操作步驟
實驗開始前，請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制），37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。

Anogen    CEA, human     <0.72 ng/ml      3.12-100 ng/ml
Anogen    IL-17A, mouse    <2 pg/mL    15.6-1000 pg/mL
Anogen    IFN-gamma, mouse     <7.5 pg/mL    50-3200 pg/mL
Anogen    TNF-a, mouse     <4.5 pg/mL    15.6-1000 pg/mL
Anogen    GM-CSF, mouse    <17 pg/mL    50-3200 pg/mL
Anogen    MCP-1,mouse    <1.7 pg/mL    7.8-500 pg/mL
Anogen    IL-2，mouse    <2.1 pg/mL    7.8-500 pg/mL
Anogen    IL-5，mouse    <0.8 pg/mL    3.125-200 pg/mL
Anogen    IL-6，mouse    <5.24 pg/mL    12.5-800 pg/mL
Anogen    IL-4，mouse    <0.8 pg/mL    7.8-500 pg/mL
Anogen    IL-1beta，mouse    <0.8 pg/mL    7.8-500 pg/mL
Anogen    IL-1a, mouse    <0.8 pg/mL    7.8-500 pg/mL
Anogen    TGF-b1,mouse    <9.0 pg/mL    32.1-2000 pg/mL