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小鼠丙酮酸脫氫酶α(PDHα)ELISA檢測試劑盒
英文名稱:mouse Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa) ELISA Kit
貨號:ZK-M5224
規(guī)格: 96T/48T
保存條件:保質(zhì)期2-8℃低溫保存下,6個月的保質(zhì)期。
運(yùn)輸:全國各地快遞免費(fèi)送貨上門,低溫運(yùn)輸,用冰袋加泡沫保溫盒包裝,確保產(chǎn)品運(yùn)輸狀態(tài)下也處于低溫狀態(tài)。
小鼠丙酮酸脫氫酶α(PDHα)ELISA檢測試劑盒的基本原理
就是將抗原抗體固定到特定的載體上進(jìn)行反應(yīng),并通過酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化將抗原抗體反應(yīng)通過顏色的形式顯現(xiàn)出來。
(1)將抗原抗體反應(yīng)固相化:即試驗(yàn)中的包被環(huán)節(jié),使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機(jī)制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團(tuán)可以無選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結(jié)構(gòu),保持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性;
(2)封閉:固相吸附蛋白是非特異性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力,為了保障抗原抗體反應(yīng)的特異性,因此,包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無關(guān)蛋白封閉。一般認(rèn)為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑,也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。
(3)抗原抗體反應(yīng):抗原或抗體在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)下可進(jìn)行特異的抗原抗體反應(yīng)。 (4)酶反應(yīng):酶可以通過共價鍵與抗原或抗體連接形成結(jié)合物,當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時候,被檢測靶目標(biāo)中也結(jié)合了酶分子。
(5)ELISA試劑盒底物反應(yīng):結(jié)合在抗原抗體中的酶分子,可以促使底物發(fā)生顏色反應(yīng),檢測人員可以裸眼觀察,可以通過顏色來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,通過顏色的深淺判斷標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量,也可借用酶標(biāo)儀在適當(dāng)?shù)牟ㄩL讀取吸光度值。
小鼠丙酮酸脫氫酶α(PDHα)ELISA檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)測定具體步驟:
1.確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2.將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。
3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng) 90 分鐘。
4.反應(yīng)后用自動洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。 不洗。
5.將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應(yīng) 60 分鐘。
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。
7.將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng) 30 分鐘。
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 (注意:顯色時間供參考,因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異,顯色時間會有所不同。此時肉眼可 見標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色,后 3-4 孔差別不明顯)。
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。
11.用酶標(biāo)儀在 450nm 測定 OD值。
小鼠丙酮酸脫氫酶α(PDHα)ELISA檢測試劑盒人肝細(xì)胞核因子1β(HNF1β) ELISA Kit 96T 48T 0.156-10ng/mL 0.047ng/mL human Hepatocyte Nuclear Factor 1 Beta (HNF1b) ELISA Kit Homo sapiens human
大鼠丙酮酸脫氫酶激酶同工酶1(PDK1) ELISA Kit 96T 48T 0.156-10ng/mL 0.057ng/mL Rat Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 1 (PDK1) ELISA Kit Rattus norvegicus Rat
大鼠Corin蛋白(CRN) ELISA Kit 96T 48T 0.156-10ng/mL 0.065ng/mL Rat Corin (CRN) ELISA Kit Rattus norvegicus Rat
人鈣調(diào)素(RGN) ELISA Kit 96T 48T 0.313-20ng/mL 0.109ng/mL human Regucalcin (RGN) ELISA Kit Homo sapiens human
人視紫質(zhì)(RHO) ELISA Kit 96T 48T 0.313-20ng/mL 0.118ng/mL human Rhodopsin (RHO) ELISA Kit Homo sapiens human
小鼠谷氨酸脫羧酶1(GAD1) ELISA Kit 96T 48T 0.781-50ng/mL 0.31ng/mL mouse Glutamate Decarboxylase 1, Brain (GAD1) ELISA Kit Mus musculus mouse
大鼠血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5) ELISA Kit 96T 48T 0.156-10ng/mL 0.064ng/mL Rat A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 5 (ADAMTS5) ELISA Kit Rattus norvegicus Rat
大鼠血小板衍生生長因子D(PDGFD) ELISA Kit 96T 48T 0.313-20ng/mL 0.125ng/mL Rat Plaet Derived Growth Factor D (PDGFD) ELISA Kit Rattus norvegicus Rat
人環(huán)前列腺素受體(PTGIR) ELISA Kit 96T 48T 0.156-10ng/mL 0.071ng/mL human Prostacyclin Receptor (PTGIR) ELISA Kit Homo sapiens human
大鼠ELAV樣蛋白1(ELAVL1) ELISA Kit 96T 48T 0.156-10ng/mL 0.066ng/mL Rat ELAV Like Protein 1 (ELAVL1) ELISA Kit Rattus norvegicus Rat
人25kDa突觸關(guān)聯(lián)蛋白(SNAP25) ELISA Kit 96T 48T 0.156-10ng/mL 0.059ng/mL human Synaptosomal Associated Protein 25kDa (SNAP25) ELISA Kit Homo sapiens human
小鼠葡萄糖-6-磷酸酶催化亞基(G6PC) ELISA Kit 96T 48T 1.563-100ng/mL 0.52ng/mL mouse Glucose-6-Phosphatase, Catalytic (G6PC) ELISA Kit Mus musculus mouse
大鼠松弛肽3(RLN3) ELISA Kit 96T 48T 31.25-2000pg/mL 11.5pg/mL Rat Relaxin 3 (RLN3) ELISA Kit Rattus norvegicus Rat
小鼠陽離子氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(CAT1) ELISA Kit 96T 48T 0.313-20ng/mL 0.113ng/mL mouse Cationic Amino Acid Transporter 1 (CAT1) ELISA Kit Mus musculus mouse
小鼠細(xì)胞因子受體樣因子1(CRLF1) ELISA Kit 96T 48T 15.625-1000pg/mL 5.3pg/mL mouse Cytokine Receptor Like Factor 1 (CRLF1) ELISA Kit Mus musculus mouse
大鼠細(xì)胞因子受體樣因子1(CRLF1) ELISA Kit 96T 48T 0.156-10ng/mL 0.063ng/mL Rat Cytokine Receptor Like Factor 1 (CRLF1) ELISA Kit Rattus norvegicus Rat
人唾液富組蛋白1(HTN1) ELISA Kit 96T 48T 0.156-10ng/mL 0.053ng/mL human Histatin 1 (HTN1) ELISA Kit Homo sapiens human
小鼠甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP) ELISA Kit 96T 48T 0.156-10ng/mL 0.053ng/mL mouse Methylthioadenosine Phosphorylase (MTAP) ELISA Kit Mus musculus mouse
人γ-氨基丁酸A受體α2(γABRα2) ELISA Kit 96T 48T 0.156-10ng/mL 0.059ng/mL human Gamma-Aminobutyric Acid A Receptor Alpha 2 (gABRa2) ELISA Kit Homo sapiens human
人蛋白酶激活亞基3(PSME3) ELISA Kit 96T 48T 0.156-10ng/mL 0.054ng/mL human Proteasome Activator Subunit 3 (PSME3) ELISA Kit Homo sapiens human
人Cereblon蛋白(CRBN) ELISA Kit 96T 48T 0.313-20ng/mL 0.125ng/mL human Cereblon (CRBN) ELISA Kit Homo sapiens human