細(xì)胞名稱：人結(jié)腸腺癌細(xì)胞LS180細(xì)胞
細(xì)胞凍存：液氮凍存。
用途：提供用于科研研究，不得用于臨床檢測(cè)。
培養(yǎng)條件：37℃，5% CO2，PH值7.2~7.4，無(wú)菌恒溫培養(yǎng)。
細(xì)胞數(shù)量：1× 106個(gè)
細(xì)胞傳代：1:4~1:6傳代；每周換液2~3次

人結(jié)腸腺癌細(xì)胞LS180細(xì)胞復(fù)蘇:
1、應(yīng)遵守慢凍快融的原則.先將水溫鍋調(diào)至37-38度,取出凍存的細(xì)胞迅速放入后交細(xì)胞面浸至水面以下不斷搖動(dòng)至融化.
2、在無(wú)菌臺(tái)內(nèi)將*培養(yǎng)基加入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),然后用無(wú)菌吸管從凍存管內(nèi)取出細(xì)胞,置培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)輕輕搖晃,使細(xì)胞均勻后置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，24h后換液；也可復(fù)蘇當(dāng)時(shí)離心（1000rpm 5min左右）后，*培養(yǎng)基重懸培養(yǎng)，適時(shí)換液。

傳代:
1、貼壁細(xì)胞:
對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱.PBS清洗2-3次，去除血清和死細(xì)胞，50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約0.6ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)配制強(qiáng)度經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后收集離心（1000rpm 5min左右）,新鮮培養(yǎng)基重懸沉淀，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn).
2、懸浮細(xì)胞:
 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度或需更換新培養(yǎng)基，可先離心（1000rpm,5min左右）后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng). 

客戶須知：
詳細(xì)說(shuō)明進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的組織，并確定組織是由客戶提供還是本公司提供；盡可能提供該細(xì)胞的培養(yǎng)條件，或者由本公司摸索培養(yǎng)條件；對(duì)于一些常見(jiàn)的培養(yǎng)組織，因?yàn)楸４孢\(yùn)輸?shù)牟槐憧赡軙?huì)降低培養(yǎng)的成功率，建議客戶選擇由本公司提供相應(yīng)的組織。
根據(jù)客戶需要，可提供細(xì)胞的培養(yǎng)，培養(yǎng)周期視細(xì)胞類型和生長(zhǎng)情況而定。
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項(xiàng)
1）實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)用紫外燈照射30~60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面，并開(kāi)啟超凈臺(tái)風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)20min左右再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。
2）實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺(tái)內(nèi)；實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺(tái)，以利于氣流的流通。實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面。
3）每次操作只處理一種細(xì)胞；即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細(xì)胞間的交叉污染。
4）操作時(shí)小心取用無(wú)菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開(kāi)的容器瓶口正上方操作，容器打開(kāi)后，傾斜45°操作，操作完成后及時(shí)蓋上瓶蓋。
5）CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應(yīng)1~2個(gè)月對(duì)培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤(pán)2~3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，zui后紫外燈照射4h以上。水盤(pán)內(nèi)加入無(wú)菌水（應(yīng)每周更換），待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。

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