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細胞存活率檢測試劑盒Cell Viability Assay Kit現
細胞融合劑Cell Fusion Solution/子科生物現貨
細胞消化液Cell Dissociation Solution/100
細胞名稱:人結腸腺癌細胞LS180細胞
細胞凍存:液氮凍存。
用途:提供用于科研研究,不得用于臨床檢測。
培養條件:37℃,5% CO2,PH值7.2~7.4,無菌恒溫培養。
細胞數量:1× 106個
細胞傳代:1:4~1:6傳代;每周換液2~3次
人結腸腺癌細胞LS180細胞復蘇:
1、應遵守慢凍快融的原則.先將水溫鍋調至37-38度,取出凍存的細胞迅速放入后交細胞面浸至水面以下不斷搖動至融化.
2、在無菌臺內將*培養基加入培養瓶內,然后用無菌吸管從凍存管內取出細胞,置培養瓶內輕輕搖晃,使細胞均勻后置培養箱內培養,24h后換液;也可復蘇當時離心(1000rpm 5min左右)后,*培養基重懸培養,適時換液。
傳代:
1、貼壁細胞:
對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱.PBS清洗2-3次,去除血清和死細胞,50ml培養瓶加入消化液約0.6ml,按此比例進行消化,(根據配制強度經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后收集離心(1000rpm 5min左右),新鮮培養基重懸沉淀,加入*培養基后繼續培養或實驗.
2、懸浮細胞:
一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度或需更換新培養基,可先離心(1000rpm,5min左右)后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養.
客戶須知:
詳細說明進行細胞培養的組織,并確定組織是由客戶提供還是本公司提供;盡可能提供該細胞的培養條件,或者由本公司摸索培養條件;對于一些常見的培養組織,因為保存運輸的不便可能會降低培養的成功率,建議客戶選擇由本公司提供相應的組織。
根據客戶需要,可提供細胞的培養,培養周期視細胞類型和生長情況而定。
預防細胞污染的注意事項
1)實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30~60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風機運轉20min左右再開始實驗操作。
2)實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內;實驗用品用完應移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。
3)每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養基也不要共享同一瓶培養基,避免細胞間的交叉污染。
4)操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。
5)CO2培養箱的清潔是較易被忽視的地方,應1~2個月對培養箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養箱內壁、隔板、水盤2~3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,zui后紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水(應每周更換),待培養箱內溫度、濕度、CO2濃度穩定后再放入細胞。
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