細(xì)胞名稱：人結(jié)直腸癌細(xì)胞/HCT116細(xì)胞
生長特性：貼壁生長
運(yùn)輸方式：凍存細(xì)胞，快遞干冰運(yùn)輸；復(fù)蘇之后，常溫下運(yùn)輸。
細(xì)胞來源：ATCC來源，國家工程細(xì)胞研究中心。
包裝：培養(yǎng)瓶加說明書。
細(xì)胞凍存：液氮凍存。
用途：提供用于科研研究，不得用于臨床檢測。
培養(yǎng)條件：37℃，5% CO2，PH值7.2~7.4，無菌恒溫培養(yǎng)。
細(xì)胞數(shù)量：1× 106個(gè)
細(xì)胞傳代：1:4~1:6傳代；每周換液2~3次。

人結(jié)直腸癌細(xì)胞/HCT116細(xì)胞細(xì)胞復(fù)蘇：
1、打開水浴鍋, 預(yù)熱到37度
2、從液氮罐中出凍存的細(xì)胞，迅速放入37度水浴鍋快速溶解
3、在超凈臺(tái)中，把溶解的細(xì)胞移入離心管，（離心管內(nèi)先加入２ＭＬ左右的培養(yǎng)基）．１０００ＲＰＭ 離心５分鐘
4、棄上清，加入１ＭＬ培養(yǎng)基，吹打均勻，移入培養(yǎng)瓶內(nèi)，（培養(yǎng)瓶內(nèi)先加入４－５ＭＬ培養(yǎng)基），３７度過５％ＣＯ２培養(yǎng)箱培養(yǎng)
5、第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
傳代：
1、當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到90%以上時(shí)，給細(xì)胞傳代；
2、37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
3、在超凈臺(tái)中，棄培養(yǎng)基，加入2-5mlPBS清洗細(xì)胞后，再加入1ml胰酶消化細(xì)胞；
4、顯微鏡下觀察到細(xì)胞變圓，有細(xì)胞開始脫離瓶壁時(shí)，加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
5、用移液器輕輕吹下瓶壁上剩余的細(xì)胞，并輕輕吹打?qū)⒓?xì)胞吹散；
6、將細(xì)胞移入離心管中，1000rpm離心5min；
7、棄上清，加入15-20ml的培養(yǎng)基（含血清）重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T75培養(yǎng)瓶中或按適當(dāng)比例傳到T25瓶中（確保細(xì)胞貼壁后融合度在25-50%之間），細(xì)胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25瓶），混勻細(xì)胞懸液，確保細(xì)胞均勻分布；
8、將培養(yǎng)瓶置于37°C，5% CO2的無菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

凍存：
1、將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
2、準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配） 或95％ＦＢＳ＋5％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
3、加1.5毫升凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘.  放入-20度冰箱1－3小時(shí)后．再放入-80度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
4、原則：慢凍速溶
5、加1.5毫升凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。

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