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人結(jié)直腸癌細(xì)胞/HCT116細(xì)胞

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品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地深圳市

更新時(shí)間:2016-07-06 17:14:38瀏覽次數(shù):463次

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人結(jié)直腸癌細(xì)胞/HCT116細(xì)胞,深圳子科生物擁有一個(gè)龐大的細(xì)胞庫,凍存了上千萬種細(xì)胞系,能滿足大部分實(shí)驗(yàn)工作者的細(xì)胞需求,能保證提供給您的細(xì)胞活性高,傳代穩(wěn)定,并配有經(jīng)驗(yàn)豐富的專業(yè)技術(shù)老師,可以給您提供專業(yè)化的技術(shù)指導(dǎo),讓您售后無憂!咨詢

細(xì)胞名稱:人結(jié)直腸癌細(xì)胞/HCT116細(xì)胞
生長特性:貼壁生長
運(yùn)輸方式:凍存細(xì)胞,快遞干冰運(yùn)輸;復(fù)蘇之后,常溫下運(yùn)輸。
細(xì)胞來源:ATCC來源,國家工程細(xì)胞研究中心。
包裝:培養(yǎng)瓶加說明書。
細(xì)胞凍存:液氮凍存。
用途:提供用于科研研究,不得用于臨床檢測。
培養(yǎng)條件:37℃,5% CO2,PH值7.2~7.4,無菌恒溫培養(yǎng)。
細(xì)胞數(shù)量:1× 106個(gè)
細(xì)胞傳代:1:4~1:6傳代;每周換液2~3次。

人結(jié)直腸癌細(xì)胞/HCT116細(xì)胞細(xì)胞復(fù)蘇:
1、打開水浴鍋, 預(yù)熱到37度
2、從液氮罐中出凍存的細(xì)胞,迅速放入37度水浴鍋快速溶解
3、在超凈臺(tái)中,把溶解的細(xì)胞移入離心管,(離心管內(nèi)先加入2ML左右的培養(yǎng)基).1000RPM 離心5分鐘
4、棄上清,加入1ML培養(yǎng)基,吹打均勻,移入培養(yǎng)瓶內(nèi),(培養(yǎng)瓶內(nèi)先加入4-5ML培養(yǎng)基),37度過5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)
5、第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
傳代:
1、當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到90%以上時(shí),給細(xì)胞傳代;
2、37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
3、在超凈臺(tái)中,棄培養(yǎng)基,加入2-5mlPBS清洗細(xì)胞后,再加入1ml胰酶消化細(xì)胞;
4、顯微鏡下觀察到細(xì)胞變圓,有細(xì)胞開始脫離瓶壁時(shí),加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
5、用移液器輕輕吹下瓶壁上剩余的細(xì)胞,并輕輕吹打?qū)⒓?xì)胞吹散;
6、將細(xì)胞移入離心管中,1000rpm離心5min;
7、棄上清,加入15-20ml的培養(yǎng)基(含血清)重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T75培養(yǎng)瓶中或按適當(dāng)比例傳到T25瓶中(確保細(xì)胞貼壁后融合度在25-50%之間),細(xì)胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25瓶),混勻細(xì)胞懸液,確保細(xì)胞均勻分布;
8、將培養(yǎng)瓶置于37°C,5% CO2的無菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

凍存:
1、將細(xì)胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2、準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配) 或95%FBS+5%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3、加1.5毫升凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘.  放入-20度冰箱1-3小時(shí)后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
4、原則:慢凍速溶
5、加1.5毫升凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。

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