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價格規格:100T/盒
特異性:人、大鼠、小鼠
保存條件:4°C保存一年
Actin mRNA原位雜交試劑盒/子科供應試劑盒內容:
1.Actin寡核苷酸探針雜交液 2ml;
2.預雜交液 2ml;
3.胃蛋白酶(×10;Pepsin) 2ml;
4.封閉液 5ml;
5.生物素化鼠抗的高辛 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化過氧化物酶 5ml。
原位雜交的注意事項:
原位雜交成套試劑盒,由于采用高效標記的探針和敏感性加強型原位雜交檢測試劑盒;使得原位雜交實驗的成功率大大提高,操作也更簡便。但仍有一些問題是引起注意的;
1、有條件應盡可能用新鮮標本,并及時進行固定。固定液為4%多聚甲醛(0.1MPBS,PH7.0-7.6)含0.1%DEPC。因為mRNA類基因容易降解。
2、標本的消化對原位雜交比較重要,適當的消化將使靶基因充分暴露,增加探針的接觸性。但過度的消化將使標本明顯減薄乃至消失。不同的標本對消化的敏感性不同。常用的消化酶有蛋白酶K和胃蛋白酶。大量標本實驗前,應仔細摸索的消化條件。蛋白酶K的消化條件為10ug/mL(0.1M TBS,PH7.2-7.6),37℃消化1-5分鐘。
3、雜交后的洗滌對信號/背景/強度有密切關系,洗滌時間越短,信號越強,背景也越高;洗滌時間超長,信號越低。適當的洗滌時間會獲得理想的信號強度和可以忽略的背景染色。
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