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[產品名稱]小鼠Ⅲ型膠原(COL3)ELISA檢測試劑盒
[英文名稱]mouse Collagen Type III (COL3) ELISA Kit
[貨號]ZK-M5338
[試劑盒]保存條件、保質期2-8℃低溫保存下,6個月的保質期。
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小鼠Ⅲ型膠原(COL3)ELISA檢測試劑盒實驗所涉及到的儀器如下:
1、酶 標 儀
酶標比色儀介紹:
酶標比色儀簡稱酶標儀,通常指于測讀ELISA結果吸光度的光度計。針對固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設計。許多試劑公司配套供應酶標儀。酶標儀的主要性能指標有:測讀速度、讀數的準確性、重復性、精確度和可測范圍、線性等等。優良的酶標儀的讀數一般可精確到0.001,準確性為lusm1%,重復性達0.5%。舉例說,若某孔測得的A值為1.083,則該孔相對于空氣的真實A值應為1.083lusm0.01(1.073~1.093),復測定數次,其A值均應1.083lusm0.05(1.078~1.088)在之間。酶標儀的可測范圍視各酶標儀的性能而不同。普通的酶標儀在0.000~2.000,新型號的酶標儀上限拓寬達2.900,甚至更高。超出可測上限的A值常以"*"或"over"或其它符號表示。應注意可測范圍與線性范圍的不同,線性范圍常小于可測范圍,比如某一酶標儀的可測范圍為0.000~2.900,而其線性范圍僅0.000~2.000,這在定量ELISA中制作標準曲線時應予注意。
酶標儀不應安置在陽光或強光照射下,操作時室溫宜在15~30℃,使用前先預熱儀器15-30分鐘,測讀結果更穩定。
測讀A值時,要選用產物的敏感吸收峰,如OPD用492nm波長。有的酶標儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,*次在zui適波長(W1),第二次在不敏感波長(W2),兩次測定間不移動ELISA板的位置。例如OPD用492nm為W1,630nm為W2,zui終測得的A值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。各種酶標儀性能有所不同,使用中應參考對應儀器說明書。
2、洗 板 機
3、離 心 機
4、培 養 箱
小鼠Ⅲ型膠原(COL3)ELISA檢測試劑盒有兩種設定空白對照的方案:
(1)將 TMB 空白顯色孔設為對照。所有的標準品和樣品的吸光值減去 TMB 空白顯色孔的 吸 光 值 后 , 在 坐 標 紙 上 畫 出 曲 線 , 以 吸 光 值 作 為 縱 坐 標 , 以 濃 度 作 為 橫 坐 標 。
(2)將零孔設為對照。所有的標準品和樣品的吸光值減去零孔的吸光值后,得到的數據可以 直接在坐標紙上畫出曲線。
小鼠Ⅲ型膠原(COL3)ELISA檢測試劑盒樣品稀釋的一般原則
用戶須估計樣品待測因子的含量,決定適當的稀釋倍數,以使稀釋后樣品中待測因子的濃度 處于 ELISA 試劑盒的檢測范圍。根據待測因子含量高、中、低的不同,分別采取不同的稀釋方案:
高:指待測因子在 20-200ng/ml。一般按 1:100 稀釋。297μ ι 樣品稀釋液加 3μ ι 樣品。
中:指待測因子在 2-20ng/ml。一般按 1:10 稀釋。225μ ι 樣品稀釋液加 25μ ι 樣品。
低:指待測因子在 31.2→2000pg/ml。按 1:2 稀釋。100μ ι 樣品稀釋液加 100μ ι 樣品。
特低:指待測因子≤31.2pg/ml。樣品一般不做稀釋,按每孔 100μ ι 樣品直接加入。
以上方案僅供參考,樣品的稀釋應有詳細記錄。
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