小鼠維生素D3（VD3）ELISA試劑盒?有效期： 4 個月(4℃)；8 個月（-20℃）。 
?保存方法： 2-8℃（頻繁使用時）; -20℃（長時間不用時）。 
?品牌：子科生物ZIKER,美國R&D,美國immonoway,美國sciencell,德國IBL
?質量保證：我告訴所有產品均需要經過質檢通過后，才允許出庫！
?適用范圍：實驗結果僅供科研參考，不推薦用于臨床診斷結果。
?ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等，子科生物ELISA產品主要用雙抗體夾心法。

客戶購買子科生物小鼠維生素D3（VD3）ELISA試劑盒須知：
1、子科生物所提供的試劑產品，均為科研試劑，僅供科研使用，不得用于注射、藥品、食用,血更不能用于臨床檢測和動物防疫檢測或其他用途，對此造成的任何利潤與損失、間接損失、損害承擔責任經濟糾紛，我司不承擔任何責任。
2、買方在提貨或收貨時，請仔細檢查貨物包裝，如發現包裝破損，應拒收或拍照取證，隨后轉發給我司，買方一旦簽收，我司將不對產品的包裝狀態負責；買方收到貨品后，應及時清點，若發現貨物短缺，應于簽收當天通知我司，若簽收次日我司尚未收到買方通知，則視為買方確認無短缺。
3、我們向您保證我們提供的產品均經過鑒定為合格產品，如果真的有任何質量問題，請您在收到產品1個月內以書面的形式及時通知我司，超過時間不予受理，我們將給您提供*周到及時的技術售后處理。標本的稀釋原則：
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。zui后計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。
標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。
如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
操作步驟
實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。

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