小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒子科生物研發生產,深圳子科生物ELISA試劑盒優質供應商,擁有10年的研發和生產經驗,擁有*的儀器設備,專業的技術人員和*的實驗技術,目前已經建立強大的實驗技術服務平臺,品牌設立為:ZIKER 。
?產品名稱:小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒
?英文名稱:Mouse Neuroglobin,NGB ELISA Kit
?產品規格:96T(人份)/48T(人份)(單孔檢測分別可以檢測90份樣本,42分樣本,一般都需要留6個孔做標準曲線)。
?檢測方法:酶聯免疫分析ELISA方法
?有效期: 4 個月(4℃);8 個月(-20℃)。
?保存方法: 2-8℃(頻繁使用時); -20℃(長時間不用時)。
?品牌:子科生物ZIKER,美國R&D,美國immonoway,美國sciencell,德國IBL
?質量保證:我告訴所有產品均需要經過質檢通過后,才允許出庫!
小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒血清標本可按常規方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。
血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。如在冰箱中保存過久,其中的可發生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。
一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存。凍結血清
融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢吮緫入x心或過濾,澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作,也可加入適當防腐劑。
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實驗測定具體步驟:
1.確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數=樣品數+9;做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2.將標準品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于血清、體液、 組織勻漿或細胞培養上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。
3.酶標板加上蓋,37℃反應 90 分鐘。
4.反應后用自動洗板機吸去酶標板內的液體;或甩去酶標板內液體,再對著吸水紙拍幾下。 不洗。
5.將準備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應 60 分鐘。
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。
7.將準備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應 30 分鐘。
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應 20-25 分鐘 (注意:顯色時間供參考,因用戶實驗室條件差異,顯色時間會有所不同。此時肉眼可 見標準品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍色,后 3-4 孔差別不明顯)。
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時藍色立轉黃色。
11.用酶標儀在 450nm 測定 OD值。
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