?產品名稱：小鼠甲狀腺素（T4）ELISA試劑盒
?英文名稱：Mouse thyroxine,T4 ELISA Kit
?產品規格：96T（人份）/48T（人份）（單孔檢測分別可以檢測90份樣本，42分樣本，一般都需要留6個孔做標準曲線）。
?檢測方法：酶聯免疫分析ELISA方法
?有效期： 4 個月(4℃)；8 個月（-20℃）。 
?保存方法： 2-8℃（頻繁使用時）; -20℃（長時間不用時）。 
?品牌：子科生物ZIKER,美國R&D,美國immonoway,美國sciencell,德國IBL
?質量保證：我告訴所有產品均需要經過質檢通過后，才允許出庫！
?適用范圍：實驗結果僅供科研參考，不推薦用于臨床診斷結果。
?ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等，子科生物ELISA產品主要用雙抗體夾心法。

小鼠甲狀腺素（T4）ELISA試劑盒標本的處理 
可用作 ELISA 測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液）、 細胞培養上清、細胞、組織等均可作標本以測定其中某種成份。有些標本可直接進行測定，有些 則需經預處理。 
● 血清： 
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后，離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）。收集上清。如 有沉淀形成，應再次離心。 
● 血漿： 
應根據試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入 10 ％（ v/v ）抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分鐘后，離心 20 分鐘左右 （ 2000-3000 轉 / 分）。仔細收集上清。如有沉淀形 成，應再次離心。 
●尿液、胸腹水、腦脊液： 
用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）。仔細收集上清。如有沉淀形成， 應再次離心。
●細胞培養上清：
 檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）。仔細收集 上清。檢測細胞內的 成份時，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到 100 萬 /ml 左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。 
●細胞： 
檢測細胞的成份時，對于貼壁細胞，去除培養液，用PBS、理鹽水或無血清培養液洗一遍。加 入適量裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞10 秒后，細胞 就會被裂解。對于懸浮細胞，離心收集細胞，用PBS、理鹽水或無血清培養液洗一遍.加入適 量裂解液, 用槍吹打把細胞吹散。用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉 淀。如果細胞量較多，必需分裝然后再裂解。充分裂解后，10000-14000g離心3-5 分鐘，取上 清，即可進行后續操作。 
●組織標本： 
切割標本后，稱取重量。加入一定量的 PBS 或組織蛋白萃取試劑，緩沖液中可加入蛋白酶抑制 劑。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）。仔細收集 上清置于 -20 度或 - 70 度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

操作步驟
實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。

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