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小鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒

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所  在  地深圳市

更新時間:2016-06-17 16:11:58瀏覽次數:114次

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[產品名稱]小鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒
[英文名稱]Mouse Estradiol,E2 ELISA Kit
[貨號]ZK-M4691
[試劑盒]保存條件、保質期2-8℃低溫保存下,6個月的保質期。
[運輸方式]當地客戶可以由專門配送人員免費送貨上門貨快遞,外地客戶當天下單當天免費快遞送貨上門。
[技術服務]凡購買子科生物子科生物任何一款ELISA酶聯免疫分析檢測試劑盒,都可以享受免費代測服務,外地客戶可以由技術老師的指導下正確放置好樣本的保存方式后快遞郵寄到我公司技術部,本地客戶可以享受免費上門取樣服務!

小鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒標本的處理 
可用作 ELISA 測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液)、 細胞培養上清、細胞、組織等均可作標本以測定其中某種成份。有些標本可直接進行測定,有些 則需經預處理。 
● 血清: 
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。收集上清。如 有沉淀形成,應再次離心。 
● 血漿: 
應根據試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右 ( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。如有沉淀形 成,應再次離心。 
●尿液、胸腹水、腦脊液: 
用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。如有沉淀形成, 應再次離心。
●細胞培養上清:
 檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集 上清。檢測細胞內的 成份時,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀釋細胞懸液,細胞濃度達到 100 萬 /ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 
●細胞: 
檢測細胞的成份時,對于貼壁細胞,去除培養液,用PBS、理鹽水或無血清培養液洗一遍。加 入適量裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞10 秒后,細胞 就會被裂解。對于懸浮細胞,離心收集細胞,用PBS、理鹽水或無血清培養液洗一遍.加入適 量裂解液, 用槍吹打把細胞吹散。用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉 淀。如果細胞量較多,必需分裝然后再裂解。充分裂解后,10000-14000g離心3-5 分鐘,取上 清,即可進行后續操作。 
●組織標本: 
切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS 或組織蛋白萃取試劑,緩沖液中可加入蛋白酶抑制 劑。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集 上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

實驗所涉及到的儀器如下:
1、酶 標 儀
酶標比色儀介紹:
酶標比色儀簡稱酶標儀,通常指于測讀ELISA結果吸光度的光度計。針對固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設計。許多試劑公司配套供應酶標儀。酶標儀的主要性能指標有:測讀速度、讀數的準確性、重復性、精確度和可測范圍、線性等等。優良的酶標儀的讀數一般可精確到0.001,準確性為lusm1%,重復性達0.5%。舉例說,若某孔測得的A值為1.083,則該孔相對于空氣的真實A值應為1.083lusm0.01(1.073~1.093),復測定數次,其A值均應1.083lusm0.05(1.078~1.088)在之間。酶標儀的可測范圍視各酶標儀的性能而不同。普通的酶標儀在0.000~2.000,新型號的酶標儀上限拓寬達2.900,甚至更高。超出可測上限的A值常以"*"或"over"或其它符號表示。應注意可測范圍與線性范圍的不同,線性范圍常小于可測范圍,比如某一酶標儀的可測范圍為0.000~2.900,而其線性范圍僅0.000~2.000,這在定量ELISA中制作標準曲線時應予注意。
酶標儀不應安置在陽光或強光照射下,操作時室溫宜在15~30℃,使用前先預熱儀器15-30分鐘,測讀結果更穩定。
測讀A值時,要選用產物的敏感吸收峰,如OPD用492nm波長。有的酶標儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,*次在zui適波長(W1),第二次在不敏感波長(W2),兩次測定間不移動ELISA板的位置。例如OPD用492nm為W1,630nm為W2,zui終測得的A值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。各種酶標儀性能有所不同,使用中應參考對應儀器說明書。
2、洗 板 機
3、離 心 機
4、培 養 箱

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