大鼠組氨酸豐富糖蛋白(HRG)ELISA試劑盒子科生物現(xiàn)貨供應(yīng),子科生物專業(yè)生產(chǎn)研發(fā)經(jīng)營(yíng)穩(wěn)定、優(yōu)質(zhì)、高效、實(shí)用的ELISA試劑盒,本公司可以提供ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè),ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)零售,是ELISA試劑盒專業(yè)生產(chǎn)廠家,并代理各大進(jìn)口原裝品牌ELISA試劑盒,貨期短,*,原裝正品,!報(bào)價(jià),檢測(cè)原理,使用說(shuō)明書(shū),咨詢免費(fèi)索要!
●產(chǎn)品名稱:大鼠組氨酸豐富糖蛋白(HRG)ELISA試劑盒
●英文名稱:Rat Histidine Rich Glycoprotein (HRG) ELISA Kit
●貨號(hào):ZK-R4525
●規(guī)格: 96T/48T
●品牌:子科生物ZIKER
●反應(yīng)時(shí)間: 1-5h
●所需樣本體積: 50-100ul
●檢測(cè)波長(zhǎng): 450 nm
●用途: For research use only. Not for diagnostic use.
●特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
●服務(wù):子科生物所有的elisa試劑盒均可免費(fèi)代測(cè),全程Elisa實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)。
●運(yùn)輸:全國(guó)各地快遞免費(fèi)送貨上門,低溫運(yùn)輸,用冰袋加泡沫保溫盒包裝,確保產(chǎn)品運(yùn)輸狀態(tài)下也處于低溫狀態(tài)。
大鼠組氨酸豐富糖蛋白(HRG)ELISA試劑盒操作步驟
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
大鼠組氨酸豐富糖蛋白(HRG)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
☆試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存。實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
☆加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔之見(jiàn)的時(shí)間間隔過(guò)大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性;一般加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi),如果樣本數(shù)量過(guò)多,可使用多道移液器。
☆孵育:樣品要在密閉的容器內(nèi)進(jìn)行孵育,嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
☆洗滌:洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中的殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指痕跡,避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
☆反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,10分鐘左右),如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
☆建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
☆建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),可和所購(gòu)經(jīng)銷商,如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
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