大鼠玻連蛋白(VTN)ELISA試劑盒●品牌：子科生物ZIKER,美國R&D,美國immonoway,美國sciencell,德國IBL
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大鼠玻連蛋白(VTN)ELISA試劑盒的基本原理
就是將抗原抗體固定到特定的載體上進(jìn)行反應(yīng)，并通過酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化將抗原抗體反應(yīng)通過顏色的形式顯現(xiàn)出來。
（1）將抗原抗體反應(yīng)固相化：即試驗(yàn)中的包被環(huán)節(jié)，使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機(jī)制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團(tuán)可以無選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結(jié)構(gòu)，保持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性；
（2）封閉：固相吸附蛋白是非特異性的，在包被目的免疫蛋白后，未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力，為了保障抗原抗體反應(yīng)的特異性，因此，包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無關(guān)蛋白封閉。一般認(rèn)為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑，也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。
（3）抗原抗體反應(yīng)：抗原或抗體在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)下可進(jìn)行特異的抗原抗體反應(yīng)。 （4）酶反應(yīng)：酶可以通過共價鍵與抗原或抗體連接形成結(jié)合物，當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時候，被檢測靶目標(biāo)中也結(jié)合了酶分子。
（5）ELISA試劑盒底物反應(yīng)：結(jié)合在抗原抗體中的酶分子，可以促使底物發(fā)生顏色反應(yīng)，檢測人員可以裸眼觀察，可以通過顏色來判定是否有免疫反應(yīng)的存在，通過顏色的深淺判斷標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量，也可借用酶標(biāo)儀在適當(dāng)?shù)牟ㄩL讀取吸光度值。

大鼠玻連蛋白(VTN)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)： 
●每個標(biāo)本量收集體積＝ 100ul × 檢測種類，如要做復(fù)孔，標(biāo)本量收集體積＝ 100ul × 檢測 種類×2 。 
● 對于作某一個具體指標(biāo)來說，先用一系列稀釋度作一批標(biāo)本測定，得出對實(shí)驗(yàn)有意義 的一個稀釋度（即測定劑量反應(yīng)曲線），然后用一個zui適稀釋度測定即可。 
● 收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本，儲存在 4 ℃ 備用，如有特殊原因需要周期收集標(biāo)本，將標(biāo)本及時分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條 件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時， -20 ℃ 可保存 1 個月。 -70 度 可保存 6 個月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。 
● 血清標(biāo)本采集時，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)， 以 HRP 為標(biāo)記的 ELISA 測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。 
●為了保證尿液檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，必須正確收集尿液標(biāo)本和保存。盛尿容器要清潔干燥。 使用一次性的容器（如塑料尿杯），避免因用藥并清洗不干凈而造成的污染，影響檢 測結(jié)果。尿液標(biāo)本必須新鮮，留取后，應(yīng)及時檢測或保存，以免細(xì)菌繁殖。因在室溫中久 置后（尤其是夏季）尿中磷酸鹽等可析出結(jié)晶而干擾檢測。 
● 標(biāo)本宜在新鮮時檢測。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性 HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。 保存過久可發(fā)生聚合在 ELISA 中可使本底加深。 
● 凍結(jié)標(biāo)本融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛 倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。 
● 混濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。 
● 反復(fù)凍融會使蛋白效價降低，所以待測標(biāo)本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。也可 加入適當(dāng)防腐劑。 
● 如果您在實(shí)驗(yàn)中遇到任何特殊問題，敬請咨詢我公司深圳子科生物技術(shù)部。

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