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深圳子科生物科技有限公司專業(yè)研發(fā)生產(chǎn)酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒,ELISA 檢測(cè)的目的是為實(shí)驗(yàn)提供準(zhǔn)確可靠的定量分析實(shí)驗(yàn)依據(jù),為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須堅(jiān)持全面質(zhì)量控制和全過(guò)程質(zhì)量控制。在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃。
子科生物技術(shù)部總結(jié)介紹如下:
大鼠葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
●每個(gè)標(biāo)本量收集體積= 100ul × 檢測(cè)種類,如要做復(fù)孔,標(biāo)本量收集體積= 100ul × 檢測(cè) 種類×2 。
● 對(duì)于作某一個(gè)具體指標(biāo)來(lái)說(shuō),先用一系列稀釋度作一批標(biāo)本測(cè)定,得出對(duì)實(shí)驗(yàn)有意義 的一個(gè)稀釋度(即測(cè)定劑量反應(yīng)曲線),然后用一個(gè)zui適稀釋度測(cè)定即可。
● 收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在 4 ℃ 備用,如有特殊原因需要周期收集標(biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條 件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時(shí), -20 ℃ 可保存 1 個(gè)月。 -70 度 可保存 6 個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
● 血清標(biāo)本采集時(shí),應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì), 以 HRP 為標(biāo)記的 ELISA 測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
●為了保證尿液檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,必須正確收集尿液標(biāo)本和保存。盛尿容器要清潔干燥。 使用一次性的容器(如塑料尿杯),避免因用藥并清洗不干凈而造成的污染,影響檢 測(cè)結(jié)果。尿液標(biāo)本必須新鮮,留取后,應(yīng)及時(shí)檢測(cè)或保存,以免細(xì)菌繁殖。因在室溫中久 置后(尤其是夏季)尿中磷酸鹽等可析出結(jié)晶而干擾檢測(cè)。
● 標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性 HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。 保存過(guò)久可發(fā)生聚合在 ELISA 中可使本底加深。
● 凍結(jié)標(biāo)本融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛 倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。
● 混濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè)。
● 反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低,所以待測(cè)標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。也可 加入適當(dāng)防腐劑。
● 如果您在實(shí)驗(yàn)中遇到任何特殊問(wèn)題,敬請(qǐng)咨詢我公司深圳子科生物技術(shù)部。
大鼠葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法:
1、 血清……操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿……將組織加入適量理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存……如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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