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[產(chǎn)品名稱]大鼠亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA試劑盒
[英文名稱]Rat Leucine Aminopeptidase (LAP) ELISA Kit
[貨號(hào)]ZK-R4221
[試劑盒]保存條件、保質(zhì)期2-8℃低溫保存下,6個(gè)月的保質(zhì)期。
[運(yùn)輸方式]當(dāng)?shù)乜蛻艨梢杂蓪iT配送人員免費(fèi)送貨上門貨快遞,外地客戶當(dāng)天下單當(dāng)天免費(fèi)快遞送貨上門。
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大鼠亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA試劑盒標(biāo)本類型
ELISA 常見(jiàn)的標(biāo)本一般包括:
● 液體類標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
● 培養(yǎng)細(xì)胞
● 組織標(biāo)本
這些標(biāo)本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。
標(biāo)本的保存
一般說(shuō)來(lái),在 5 天內(nèi)測(cè)定的標(biāo)本可放置于 4℃,超過(guò)一周測(cè)定的需低溫凍存。 對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在 4 ℃ 備用,如有特殊原因需要周期收集標(biāo)本, 將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條件下保存。避免反復(fù)凍融。 標(biāo)本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時(shí), -20 ℃ 可保存 1 個(gè)月。 -70 度可保存 6 個(gè)月。部分標(biāo) 本也可加入適當(dāng)防腐劑,激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
大鼠亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA試劑盒標(biāo)本的處理
可用作 ELISA 測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液)、 細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞、組織等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定,有些 則需經(jīng)預(yù)處理。
● 血清:
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。收集上清。如 有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
● 血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右 ( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形 成,應(yīng)再次離心。
●尿液、胸腹水、腦脊液:
用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成, 應(yīng)再次離心。
●細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集 上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的 成份時(shí),用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬(wàn) /ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
●細(xì)胞:
檢測(cè)細(xì)胞的成份時(shí),對(duì)于貼壁細(xì)胞,去除培養(yǎng)液,用PBS、理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。加 入適量裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞10 秒后,細(xì)胞 就會(huì)被裂解。對(duì)于懸浮細(xì)胞,離心收集細(xì)胞,用PBS、理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍.加入適 量裂解液, 用槍吹打把細(xì)胞吹散。用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉 淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝然后再裂解。充分裂解后,10000-14000g離心3-5 分鐘,取上 清,即可進(jìn)行后續(xù)操作。
●組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBS 或組織蛋白萃取試劑,緩沖液中可加入蛋白酶抑制 劑。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集 上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
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