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小鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒●規格: 96T/48T●反應時間: 1-5h●保存方法: 2-8℃(頻繁使用時); -20℃(長時間不用時)。 ●品牌:子科生物ZIKER●有效期: 4 個月(4℃);8 個月(-20℃)。 ●特點:靈敏性高、特異性強、重復性好●服務:子科生物所有的elisa試劑盒均可免費代測,全程Elisa實驗技術指導。
深圳子科生物所有ELISA試劑盒均需要經過質檢合格后才允許出庫,能有效控制產品質量,廣大客戶可以放心購買。且子科生物所有ELISA試劑盒里的抗體均采用進口品牌抗體,能有效保證產品的高效靈敏性,且我公司研發人員有豐富的研發經驗,*的儀器設備,*的實驗技術,讓我公司產品優于同等廠家系列產品,是您的*廠家。
小鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒操作步驟
各試劑在使用前平衡至室溫。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。除空白孔外,余孔分別加標準溶液或待測樣品100ul,注意不要有氣泡,輕輕混勻,酶標板加上蓋,37℃反應120分鐘。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。
3. 每孔加檢測溶液A工作液 100ul,37℃,60分鐘。洗板3次,350ul/每孔,甩干。
4. 每孔加檢測溶液B工作液 100ul,37℃,60分鐘,洗板5次,甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色30分鐘(此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯)。
6. 依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(此時蘭色立轉黃色)。用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
注意:
1.每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。
2.為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內。
洗板方法:
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內,浸泡1-2分鐘,根據需要,重復此過程數次。
自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
特異性:本試劑盒可同時檢測改指標,且與其它相關蛋白無交叉反應。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標(對數坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
注意事項:
1.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
2.一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。
4.如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數。
5.在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。
6.底物請避光保存。
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