小鼠Toll樣受體9（TLR-9）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)所涉及到的儀器如下：酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、離心機(jī)、培養(yǎng)箱

實(shí)驗(yàn)測(cè)定具體步驟：
1．確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目，并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9；做雙份檢測(cè)時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。 
2．將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中，1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對(duì)于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清，直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。 
3．酶標(biāo)板加上蓋，37℃反應(yīng) 90 分鐘。 
4．反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體；或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體，再對(duì)著吸水紙拍幾下。 不洗。 
5．將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。（TMB 空白顯色孔除 外）。37℃反應(yīng) 60 分鐘。 
6． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次，每次浸泡 1 分鐘左右。 
7．將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入（TMB 空白顯色孔除外）。37℃反應(yīng) 30 分鐘。 
8． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次，每次浸泡 1-2 分鐘左右。 
9．按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液，37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 （注意：顯色時(shí)間供參考，因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異，顯色時(shí)間會(huì)有所不同。此時(shí)肉眼可 見標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色，后 3-4 孔差別不明顯）。 
10．按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。 
11．用酶標(biāo)儀在 450nm 測(cè)定 OD值。

小鼠Toll樣受體9（TLR-9）ELISA試劑盒注意：收到我公司產(chǎn)品請(qǐng)*時(shí)間確認(rèn)試劑盒是否有破損，酶標(biāo)板是否封閉，使用前 TMB顯色液應(yīng)為無(wú)色透明溶液，若發(fā)現(xiàn)顏色異常，或者其他問(wèn)題請(qǐng)及時(shí)與我司售后人員進(jìn)行，我們會(huì)*次安排進(jìn)行退換。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染，底物請(qǐng)避光保存。使用之后所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理，以免造成污染！

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