小鼠Toll樣受體9（TLR-9）ELISA試劑盒實驗所涉及到的儀器如下：酶標儀、洗板機、離心機、培養箱

實驗測定具體步驟：
1．確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數目，并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數=樣品數+9；做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。 
2．將標準品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中，1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于血清、體液、 組織勻漿或細胞培養上清，直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。 
3．酶標板加上蓋，37℃反應 90 分鐘。 
4．反應后用自動洗板機吸去酶標板內的液體；或甩去酶標板內液體，再對著吸水紙拍幾下。 不洗。 
5．將準備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。（TMB 空白顯色孔除 外）。37℃反應 60 分鐘。 
6． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次，每次浸泡 1 分鐘左右。 
7．將準備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入（TMB 空白顯色孔除外）。37℃反應 30 分鐘。 
8． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次，每次浸泡 1-2 分鐘左右。 
9．按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液，37℃避光反應 20-25 分鐘 （注意：顯色時間供參考，因用戶實驗室條件差異，顯色時間會有所不同。此時肉眼可 見標準品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍色，后 3-4 孔差別不明顯）。 
10．按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液，此時藍色立轉黃色。 
11．用酶標儀在 450nm 測定 OD值。

小鼠Toll樣受體9（TLR-9）ELISA試劑盒注意：收到我公司產品請*時間確認試劑盒是否有破損，酶標板是否封閉，使用前 TMB顯色液應為無色透明溶液，若發現顏色異常，或者其他問題請及時與我司售后人員進行，我們會*次安排進行退換。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染，底物請避光保存。使用之后所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理，以免造成污染！

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