豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒深圳子科生物自主研發(fā)酶聯(lián)免疫分析檢測(cè)試劑盒,品牌為ZIKER,可以檢測(cè)Human,Rat、Mouse、Porcine、Sheep、Monkey、Goat、Bovine、Canine、Rabbit、Chicken、Duck、Fish、Plant 等各種樣本,品種齊全,質(zhì)量保證,免費(fèi)代測(cè)、技術(shù)全程支持服務(wù),我公司長(zhǎng)期跟各大高校科研實(shí)驗(yàn)室保持課題合作,經(jīng)驗(yàn)豐富,質(zhì)量穩(wěn)定!我們所有的產(chǎn)品都是我司直接供貨,無(wú)中間差價(jià),直接供貨,讓您以*惠的實(shí)驗(yàn)預(yù)算完成您的實(shí)驗(yàn)!
豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒血清樣本采集和檢測(cè)注意事項(xiàng):
1、血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
2、 血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。如在冰箱中保存過(guò)久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。
3、一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑。
豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒可用作 ELISA 測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液)、 細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞、組織等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定,有些 則需經(jīng)預(yù)處理。
● 血清:
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。收集上清。如 有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
● 血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右 ( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形 成,應(yīng)再次離心。
●尿液、胸腹水、腦脊液:
用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成, 應(yīng)再次離心。
●細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集 上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的 成份時(shí),用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬(wàn) /ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
●細(xì)胞:
檢測(cè)細(xì)胞的成份時(shí),對(duì)于貼壁細(xì)胞,去除培養(yǎng)液,用PBS、理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。加 入適量裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞10 秒后,細(xì)胞 就會(huì)被裂解。對(duì)于懸浮細(xì)胞,離心收集細(xì)胞,用PBS、理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍.加入適 量裂解液, 用槍吹打把細(xì)胞吹散。用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉 淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝然后再裂解。充分裂解后,10000-14000g離心3-5 分鐘,取上 清,即可進(jìn)行后續(xù)操作。
●組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBS 或組織蛋白萃取試劑,緩沖液中可加入蛋白酶抑制 劑。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集 上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
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