*檢測卡用于快速檢測水產(魚、蝦)組織中的*代謝物殘留,整個檢測過程需要2小時左右,適用于各類企業及檢測機構。*檢測卡檢測限為 1.0 μg/kg。
1、*檢測卡檢測原理
*檢測卡應用了競爭抑制免疫層析的原理,樣本中的*代謝物在流動的過程中與膠體金標記的特異性單克隆抗體結合,抑制了抗體和NC膜檢測線上*代謝物-BSA偶聯物的結合。如果樣本中*代謝物含量大于 1.0 μg/kg,檢測線T比質控線C淺或者T線不顯色,結果為陽性。反之,檢測線T顯色與質控線C線相當或者比C線深,結果為陰性。
2、 *檢測卡產品組成
名稱 | 數量 | 名稱 | 數量 |
*檢測卡 (含酶標孔) | 10塊 | 萃取劑 | 10瓶 |
1M鹽酸 | 1瓶 | 樣品復溶液 | 1瓶 |
衍生化試劑 | 1瓶 | 正己烷 | 1瓶 |
提取劑 | 1瓶 | 一次性吸管 | 10支 |
1M 氫氧化鈉 | 1瓶 | 說明書 | 1份 |
3、 *檢測卡樣品收集及處理
魚、蝦、蟹等水產收集于干凈的容器或自封袋中;若不能及時送檢,樣本應該去除脂肪,用剪刀剪碎或者用絞肉機攪碎后,分裝保存于-20℃下,忌反復凍融。
樣本處理
(1)取一定的組織(魚、蝦)去除脂肪后,用剪刀剪碎或者用絞肉機攪碎;
(2)取2 g已處理待測樣品于50 mL離心管中,依次加入4 mL去離子水,0.5 mL1M鹽酸,0.2 mL衍生化試劑,震蕩混勻3分鐘;
(3)60℃水浴條件下孵育 1小時;
(4)取出后,依次加入5 mL提取劑,0.4 mL1M氫氧化鈉,1瓶萃取劑,震蕩混勻1分鐘;
(5)4000轉離心5分鐘,取上層液3 mL至10 mL離心管中,于60 ℃下,利用氮氣或空氣將溶液吹干;
(6)加入1 mL正己烷,震蕩混勻 1分鐘,再移液器準確加入500 μL樣品復溶液震蕩混勻1分鐘;
(7)4000轉離心1分鐘(如果分層不明顯可延長離心時間至5分鐘)或靜置至明顯分層,下層液待測。
4、 *檢測卡操作步驟以及結果判讀
(1)測試前將未開封的*檢測卡及待檢樣品溶液恢復至室溫;
(2)從原包裝鋁箔袋中取出*檢測卡和酶標孔,在半小時內使用;
(3)用移液器吸取待檢樣品溶液100 μL于酶標孔,反復吹打至孔內紅色物質*溶解,等待反應 5分鐘;
(4)將*檢測卡平放,吸取孔內所有溶液滴加到加樣孔中,加樣后開始計時;
(5)反應5-8分鐘根據示意圖判斷結果,其它時間判讀無效;
陰性結果 : T線比C線深,或一樣深,表示樣品*代謝物濃度低于其靈敏度;
陽性結果 : T線比C線淡,表示樣品*代謝物濃度高于其靈敏度;
無效反應: 如果測試結果C線未出現,表示此試劑已失效。
5、 *檢測卡儲存及有效期
*檢測卡應在2℃~30℃陰涼避光干燥處儲存,切勿冷凍,有效期為12個月,生產日期及有效期見包裝盒。
6、 *檢測卡注意事項:
(1)檢測過程必須在20℃~30℃環境下進行;
(2)檢測時請配戴手套;
(3)切勿食用配備的試劑;
(4)請勿使用過期的*檢測卡;
(5)盡量不要觸摸*檢測卡*的白色膜面;
(6)切勿重復使用配備的滴管,以免交叉污染。