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材料和方法編輯
1.標本 人或動物的肝組織等,甲醛—鈣液固定,冰凍切片,厚10μm。
2. 改良的油紅O染色液 油紅O 0. 5g, 50%乙醇100ml。將油紅O溶于乙醇內,且不斷攪拌至*溶解即可。配制好的染液置磨口瓶內保存備用。
3. 染色步驟 ①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油紅O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自來水終止分化;④蘇木素復染核,自來水返藍,甘油明膠封片.
結果編輯
肝細胞內的脂肪滴呈紅色,細胞核呈藍色。
圖 肝脂肪變性:脂肪滴呈紅色,細胞核藍色。 改良
油紅O染色法×400
討論編輯
傳統配制油紅O染液 [1] ,所用的丙酮和異丙醇極易揮發,致使染液產生沉淀,染色時易在組織片上留下紅色的結晶,而影響結果的判斷。同時染液不易保存,每次染色時需要重新配制。我們經實驗,采用50%乙醇作為溶解劑,減少了丙酮和異丙醇易揮發對人體的危害,染液不易產生沉淀;分化劑與油紅O染液中的溶劑性質相似,這樣利于切片上多余染液的分化,故組織切片上沒有結晶產生。從而為病理診斷及鑒別診斷提供了可靠技術方法。組織常規用中性福爾馬林固定,但用甲醛—鈣液(40%甲醛10ml,蒸餾水90m1,氯化鈣1g)固定效果更好,這樣有利于保存磷脂。
封固顯示脂肪的切片時,切片不宜太干,否則易產生氣泡。發現有氣泡,不能壓蓋玻片驅趕,因為這樣會使脂滴移位。若有氣泡可用溫水浸掉蓋玻片,而后再封固。
該方法操作簡便,染色結果鮮艷,染液可反復使用。 [2]
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