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南京海克爾生物科技有限公司
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閱讀:273發布時間:2018-2-1
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A:樣本類:組織,血清,血漿,細胞,唾液,腹腔液,糞便,腦髓液,尿液,灌洗液。 B:關于細胞樣本:a:關于細胞裂解方式:加RAPA細胞裂解液(其中加多少量,根據裂解液說明書參考,一般濃度越大,加的量越少),蛋白酶抑制劑:穩定蛋白的作用。 b:從收集*個樣本開始到zui后一個樣本結束,到做實驗,樣本在一個禮拜之內是保存在2-8℃,一個禮拜至一個月保存在-20℃,超過一個月-80℃(樣本的保存問題適用于所有樣本) c:技術做過破壞性驗證:樣本保存在2-8℃做出來的結果會更好,凍存住樣本損失特別大。 B:關于血漿,血清 a:血清和血漿的區別在于多了一個纖維蛋白原。 b;血漿加抗凝劑離心,抗凝劑對實驗無影響。 c;血清有兩種收集兩種方法:①:加促凝劑,離心。②:自然凝固(不能低于兩個小時),離心。 C:組織 a;組織樣本收集三原則:①:組織樣本保持鮮重(不能用甲醛固定),②:重量不能低于50mg.③:勻漿的比例選取10%(當樣本勻漿比例大,20%,30%勻漿會不充分。當樣本濃度低時,可能會低于ELISA試劑盒檢測的下限值。) b;PBS:0.01mol,PH在4000r/min,不能超過5000r,蛋白在高速環境下易降解。 D:唾液:兩種收集方法,一種是虹吸管直接收集,另外一種是用鑷子夾棉球蘸取。 E:糞便樣本:性質狀態對實驗結果有很大影響。 F:尿液:1:1(磷酸鹽緩沖液)的比例保存。 G:關于種類的區分:例如斑馬魚和草魚,都可以用魚的指標(利用同源性相關) H:關于氣體:NO,乙烯,乙炔。用ELISA試劑盒檢測原理:氣體分子會與機體結合蛋白,有蛋白就可以測。 I:定量:直接測定樣本的陰陽性(一般都是病毒類) 定量:測定樣本的OD值。 活性;一般是檢測酶活:含量和活性成正比關系。 J:雙抗夾心法:操作簡單,靈敏性差。 間接法:試劑盒靈敏度高,操作繁瑣。(一般RD的試劑盒,都是用間接法,RD一般做細胞因子。) K: 批間值:不能超過15%,批類值:不能超過10%。進口試劑盒批間批類差小,重復性好。進口國產試劑盒都符合國家規定。 L:試劑盒做平行,可以驗證試劑盒重復性好,有效的測定有效值的取舍,三平行做出的數值標準差大于二平行。 M:出現邊緣效應:出現假陰假陽,酶標板在經過酶標儀會進行光的發散所引起的。
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