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南京海克爾生物科技有限公司
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閱讀:151發布時間:2017-10-30
產品簡介:
細胞凋亡的檢測方法有形態學研究方法,生物化學研究方法,DNA片段化檢測方法,以及TUNEL等標記片段化DNA方法,但從細胞凋亡概念產生的歷史及準確性方面考慮,使用光學顯微鏡及電子顯微鏡進行的形態學觀察是很重要的。
細胞死亡的檢測方法有用熒光色素染色區分活細胞、死細胞,測定細胞代謝活性和形態學觀察。這些方法都是利用細胞凋亡這種情況進行測定的,因而不一定反應實際情況。MTT法是測定線粒體中*酶的活性,反映細胞數目的變化,其結果與細胞死亡的數目未必一致。所以,有必要采取多種方法判斷細胞死亡。
吖啶橙嵌合到雙鏈DNA分子中顯綠色,與DNA單鏈或RNA結合時發橙色熒光。EB嵌合到DNA堿基對中間時發紅色熒光。吖啶橙可透過或細胞膜,EB不能通過與活細胞膜具有相同通透性的細胞膜。 操作步驟(僅供參考):
1.每份樣品中加入試劑(A)及試劑(B)各1ui,混合均勻;
2.500g離心細胞5min;
3.用PBS重懸細胞,將細胞密度調整為5X105 ~5X106/ml
4.每25ul細胞懸液中加入試劑(A)和試劑(B)混合液;
5..在潔凈的載玻片上加上5ul細胞懸液,蓋上蓋玻片,在熒光顯微鏡B域進行觀察;
顯綠色熒光的為活細胞,顯橙色熒光的為死細胞。
注意事項:
1.用能通過活細胞與DNA結合后發藍色熒光的Hoechist 33342和只能通過死細胞與DNA結合后發紅色熒光的碘化吡啶(propidium iodide,PI)對細胞進行二重染色的方法也比較常用。
2.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本公司產品僅供科研使用,詳情請咨詢南京森貝伽生物科技有限公司!
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