HEK-293細(xì)胞
HEK-293細(xì)胞供應(yīng)HEK-293細(xì)胞【高活性】現(xiàn)貨供應(yīng)
細(xì)胞相關(guān)知識
哺乳細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)方式有三種:貼壁培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)、無血清懸浮培養(yǎng)。這三種方式均可用于細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)。細(xì)胞在無Ca2+或 含Ca2+培養(yǎng)基中可同樣生長,也可生長在血清濃度降低的培養(yǎng)基中,單層培養(yǎng)細(xì)胞在5-10%FBS-DMEM中能生長很好。一般來講,1:10傳代后 ,一周可以長滿。嚴(yán)禁過度生長,這點(diǎn)很重要。因?yàn)闀?huì)導(dǎo)致細(xì)胞密度加大和堆積,影響病毒斑的形成和轉(zhuǎn)染,傳代時(shí)也不易打散。懸浮的 細(xì)胞很容易大規(guī)模培養(yǎng),但不容易保持穩(wěn)定。細(xì)胞在傳代120次以后,其表型可能改變,生長狀況不再*是單層的了,偶爾會(huì)形成局 部的細(xì)胞成團(tuán)聚集,應(yīng)立即拋棄,重新引入新傳代的細(xì)胞。
1、用大瓶培養(yǎng)較小瓶要好,可能是更有利于293均勻的分布,利于營養(yǎng)的攝取
2、培養(yǎng)液要新鮮,每次只配1000ml,分為2-4瓶,不用的培養(yǎng)液,凍存在-20度
3、要及時(shí)傳代,是細(xì)胞基本鋪滿培養(yǎng)瓶底部,但是細(xì)胞之間還沒有*貼緊,總是多少有空隙的時(shí)候。
4、如果細(xì)胞貼壁不好,可能是消化過久,或是培養(yǎng)瓶不夠干凈,當(dāng)然要除外細(xì)胞污染。
5、如果使用用玻璃培養(yǎng)瓶或皿,可以采用高壓滅菌的0.2%明膠溶液預(yù)處理培養(yǎng)/培養(yǎng)皿,方法是將明膠加入培養(yǎng)皿,使之浸泡到底面的各 個(gè)部分,然后吸出,置超凈臺內(nèi)晾干即可使用。這樣處理后細(xì)胞貼壁效果好且鏡下細(xì)胞立體感強(qiáng)。如果是新的塑料培養(yǎng)瓶就不用處理。
物種來源:
1.種屬:人(Human)
2.器官:胚腎(embryonic kidney)
3.類型:上皮細(xì)胞(epithelial)
培養(yǎng)條件:
1.基質(zhì):MEM/DMEM培養(yǎng)基
2.血清:10%FBS
3.環(huán)境:37℃, 5% CO2
4.消化:0.25%
5.傳代:1:6~1:10傳代, 每周一次
6.換液:2~3天
7.凍存:*培養(yǎng)基+ 5% (v/v) DMSO
特別說明:細(xì)胞置室溫一段時(shí)間后會(huì)漂浮起來,要保證貼壁請盡可以讓細(xì)胞處于37℃環(huán)境。
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