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上海拜力生物科技有限公司

NCI-H520細(xì)胞_選型注意問題

時間:2018-4-11閱讀:724

  在體細(xì)胞克隆猴的成果發(fā)布會上,神經(jīng)科學(xué)研究所所長蒲慕明院士對媒體說,克隆猴的成功,將為阿爾茨海默病、自閉癥等腦疾病以及免疫缺陷、腫瘤、代謝性疾病的機理研究、干預(yù)、診治帶來的光明前景。繼“大師兄”被克隆以來,能模擬人類疾病的“二師兄”也成功地被克隆出來。這是利用基因編輯技術(shù)CRISPR/Cas9和體細(xì)胞核移植技術(shù)(SCNT),成功培育出世界*亨廷頓舞蹈病基因敲入豬,地模擬出人類神經(jīng)退行性疾病。

  NCI-H520細(xì)胞,上海拜力生物公司細(xì)胞近3000種,來源于美國ATCC,細(xì)胞都是經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量控制,在中國大陸努力搭建正牌細(xì)胞與國內(nèi)廣大科研人員之間的溝通橋梁。為您提供NCI-H520細(xì)胞外,還有更多相關(guān)實驗產(chǎn)品,標(biāo)準(zhǔn)品,細(xì)胞株和實驗技術(shù)服務(wù)等等前期后續(xù)服務(wù)。

  1. NCI-H520細(xì)胞液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好?還是冷凍好?

  要冷藏??!因為液體培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時,其溶液的pH值會發(fā)生改變,溶液往往變堿,某些成分溶解也會受到影響對細(xì)胞生長不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年。

  2.NCI-H520細(xì)胞 液體培養(yǎng)基中的作用,及使用方法。

  幾乎所有的細(xì)胞對有較高的要求,細(xì)胞需要合成蛋白質(zhì),在缺少時,細(xì)胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的。在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20 ?C冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時,應(yīng)重新加入原來量的?;A(chǔ)醫(yī)學(xué)細(xì)胞中心在其服務(wù)項目中配制分裝了高濃度(100倍)的溶液(1ml/支)。每支1ml的加到99ml*培養(yǎng)基中,其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基。包裝為粉紅色,-24?C保存。

  3. NCI-H520細(xì)胞 培養(yǎng)用液pH對細(xì)胞生長的影響

  由于,大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4,偏離此范圍對細(xì)胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細(xì)胞對pH的要求也不*相同,原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對pH變動耐受差,無限細(xì)胞系耐受力強。

  但總體來說,細(xì)胞耐酸性比耐堿性強一些,偏酸環(huán)境中更利于細(xì)胞生長。因此,我們在配制培養(yǎng)用液時,可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。液體在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時,溶液的pH還會向上浮動0.2左右。

  4.NCI-H520細(xì)胞 細(xì)胞傳代消化時所用濃度越高越好嗎?

  不見得!因為溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度、濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關(guān)。通常情況下,pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力zui強。另外,鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進行傳代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反復(fù)沖洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶,以便于將含血清的培養(yǎng)基沖洗干凈,這樣就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液濃度為:

  (1)0.05%+0.02%EDTA;

  (2)0.25%+0.03%EDTA。

 ?。?)0.25%

  溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。

  多數(shù)細(xì)胞傳代消化可使用0.05%+0.02%EDTA這種消化液。

  購買上海拜力物細(xì)胞注意事項(拜力生物)發(fā)布

  一、客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;

  收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細(xì)胞。

  二、如為貼壁細(xì)胞,請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度:

  1. 未超過80%匯合度時,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;然后打開蓋子,先用槍頭把培養(yǎng)基吸出10ml左右,放在離心管里,然后瓶口過火(嚴(yán)禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,再用10ml的移液管,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細(xì)胞生長情況調(diào)整)之后,傳代或者凍存。

  2. 超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

  1) 棄去培養(yǎng)液,用3ml PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次;

  2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來;

  3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中,按要求分瓶。

  三、如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。

  注意:換液時一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

  四、細(xì)胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?

 ?。?)細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);

 ?。?)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);

 ?。?)存活的細(xì)胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);

 ?。?)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);

 ?。?)視具體情況而定。

  五、細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?

  (1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);

  (2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

 ?。?)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);

 ?。?)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);

 ?。?)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);

 ?。?)視具體情況而定。

  六、售后服務(wù)政策

  Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,另常備  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常備現(xiàn)貨 ;貨期短,價格優(yōu),售后齊全。

  細(xì)胞污染問題,請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi),給我們提出真實的實驗結(jié)果;細(xì)胞活性問題,請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,我們調(diào)查核實后予免費調(diào)換,不收取任何費用。

  需要客戶提供NCI-H520細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)說明、細(xì)胞操作處理方法、細(xì)胞質(zhì)量問題反饋表。

  如用戶收到細(xì)胞8-30天之內(nèi),因處理不當(dāng)造成細(xì)胞死亡或污染,我公司將優(yōu)惠價重新提供一株原細(xì)胞

  NCI-H520細(xì)胞質(zhì)量可靠,售后有保障

  我?guī)旒?xì)胞近3000種,來源于美國ATCC,細(xì)胞都是經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量控制。

  凍存細(xì)胞時間為5-7個工作日,活細(xì)胞為7-15個工作日。

  由于細(xì)胞庫現(xiàn)有細(xì)胞類目多,為了不出現(xiàn)混亂錯誤,需要了解NCI-H520細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞價格及詳細(xì)資料請老師,對您造成的不便還請見諒!

(編輯:tanxi)

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溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

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