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上海拜力生物科技有限公司

TE671 Subline No.2細胞_選購技巧

時間:2018-4-11閱讀:500

  在體細胞克隆猴的成果發布會上,神經科學研究所所長蒲慕明院士對媒體說,克隆猴的成功,將為阿爾茨海默病、自閉癥等腦疾病以及免疫缺陷、腫瘤、代謝性疾病的機理研究、干預、診治帶來的光明前景。繼“大師兄”被克隆以來,能模擬人類疾病的“二師兄”也成功地被克隆出來。這是利用基因編輯技術CRISPR/Cas9和體細胞核移植技術(SCNT),成功培育出世界*亨廷頓舞蹈病基因敲入豬,地模擬出人類神經退行性疾病。

  TE671 Subline No.2細胞,上海拜力生物公司細胞近3000種,來源于美國ATCC,細胞都是經過嚴格質量控制,在中國大陸努力搭建正牌細胞與國內廣大科研人員之間的溝通橋梁。為您提供TE671 Subline No.2細胞外,還有更多相關實驗產品,標準品,細胞株和實驗技術服務等等前期后續服務。

  1. TE671 Subline No.2細胞液體培養基的保存是冷藏好?還是冷凍好?

  要冷藏!!因為液體培養基經冷凍后再經溶化時,其溶液的pH值會發生改變,溶液往往變堿,某些成分溶解也會受到影響對細胞生長不利。故液體培養基一定要存放在冷藏箱中,通常液體培養基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年。

  2.TE671 Subline No.2細胞 液體培養基中的作用,及使用方法。

  幾乎所有的細胞對有較高的要求,細胞需要合成蛋白質,在缺少時,細胞生長不良而死亡。所以,各種培養液中都含有較大量的。在溶液中很不穩定,應置-20 ?C冰凍保存,用前加入培養基中。加有的液體培養基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的。基礎醫學細胞中心在其服務項目中配制分裝了高濃度(100倍)的溶液(1ml/支)。每支1ml的加到99ml*培養基中,其終濃度為2mM/ml培養基。包裝為粉紅色,-24?C保存。

  3. TE671 Subline No.2細胞 培養用液pH對細胞生長的影響

  由于,大多數細胞適宜pH為7.2~7.4,偏離此范圍對細胞將產生有害的影響。各種細胞對pH的要求也不*相同,原代培養細胞一般對pH變動耐受差,無限細胞系耐受力強。

  但總體來說,細胞耐酸性比耐堿性強一些,偏酸環境中更利于細胞生長。因此,我們在配制培養用液時,可把液體的pH稍微調得偏酸一些。液體在經過0.10um或0.22um濾膜過濾時,溶液的pH還會向上浮動0.2左右。

  4.TE671 Subline No.2細胞 細胞傳代消化時所用濃度越高越好嗎?

  不見得!因為溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度、濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關。通常情況下,pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力zui強。另外,鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進行傳代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反復沖洗細胞培養瓶,以便于將含血清的培養基沖洗干凈,這樣就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液濃度為:

  (1)0.05%+0.02%EDTA;

  (2)0.25%+0.03%EDTA。

  (3)0.25%

  溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。

  多數細胞傳代消化可使用0.05%+0.02%EDTA這種消化液。

  購買上海拜力物細胞注意事項(拜力生物)發布

  一、客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;

  收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。

  二、如為貼壁細胞,請在顯微鏡下觀察細胞密度:

  1. 未超過80%匯合度時,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作;然后打開蓋子,先用槍頭把培養基吸出10ml左右,放在離心管里,然后瓶口過火(嚴禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,再用10ml的移液管,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,培養瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養16hr(時間根據細胞生長情況調整)之后,傳代或者凍存。

  2. 超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。具體步驟如下:

  1) 棄去培養液,用3ml PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次;

  2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養瓶中,倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱,然后又將培養瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養培養瓶,細胞隨即脫落下來;

  3) 加入6-8ml*培養基,吸出,分到新的培養瓶中,按要求分瓶。

  三、如為懸浮細胞,吸出培養液,1000轉/分鐘離心5分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。

  注意:換液時一半用我們的培養基,一半用你們的,以免細胞不適應而造成生長不好。

  四、細胞出現問題,可重發的情況有哪些?判定標準是什么?

  (1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發;

  (2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數細胞未存活,重發;

  (3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數細胞未存活,重發;

  (4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現污染,重發;

  (5)視具體情況而定。

  五、細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些?

  (1)客戶造成細胞污染,不重發;

  (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發;

  (3)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發;

  (4)細胞培養時經其它處理的,不重發;

  (5)細胞收到2天內,未告知,不重發;

  (6)視具體情況而定。

  六、售后服務政策

  Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,另常備  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常備現貨 ;貨期短,價格優,售后齊全。

  細胞污染問題,請在收到產品48小時內,給我們提出真實的實驗結果;細胞活性問題,請在收到產品7天內給我們提出真實的實驗結果,我們調查核實后予免費調換,不收取任何費用。

  需要客戶提供TE671 Subline No.2細胞細胞培養說明、細胞操作處理方法、細胞質量問題反饋表。

  如用戶收到細胞8-30天之內,因處理不當造成細胞死亡或污染,我公司將優惠價重新提供一株原細胞

  TE671 Subline No.2細胞質量可靠,售后有保障

  我庫細胞近3000種,來源于美國ATCC,細胞都是經過嚴格質量控制。

  凍存細胞時間為5-7個工作日,活細胞為7-15個工作日。

  由于細胞庫現有細胞類目多,為了不出現混亂錯誤,需要了解TE671 Subline No.2細胞相關細胞價格及詳細資料請老師,對您造成的不便還請見諒!

(編輯:tanxi)

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