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科學網(wǎng)報道稱單細胞測序技術(shù)應用于癌癥診斷

時間:2013-12-18閱讀:2895

科學網(wǎng)報道稱,2013年12月10日學術(shù)期刊美國《國家科學院院刊》(Proceedings of the National Academy of Sciences USA)在線發(fā)表了北京大學生命科學學院生物動態(tài)光學成像中心謝曉亮、白凡課題組與北大腫瘤醫(yī)院王潔團隊合作的研究結(jié)果。在題為“Reproducible copy number variation patterns among single circulating tumor cells of lung cancer patients”的研究論文中,研究人員通過單細胞基因測序手段報道了對于癌癥病人單個外周血循環(huán)腫瘤細胞的全基因組、外顯子組測序結(jié)果,此項研究對于揭示癌癥轉(zhuǎn)移的分子機制具有重要意義,同時還為癌癥診斷提供了一種新的技術(shù)手段。

腫瘤的轉(zhuǎn)移是導致癌癥病人死亡的主要原因。早在1896年,澳大利亞籍醫(yī)生Ashworth在癌癥病人血液樣品中觀察到循環(huán)腫瘤細胞(Circulating Tumor Cell, CTC)的存在。在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中,癌細胞從原發(fā)腫瘤脫落,進入血液或淋巴循環(huán)系統(tǒng),其中一些具有高度轉(zhuǎn)移潛能的腫瘤細胞在循環(huán)系統(tǒng)中存活下來,成為循環(huán)腫瘤細胞,并進一步發(fā)展為遠端器官轉(zhuǎn)移腫瘤。循環(huán)腫瘤細胞是腫瘤發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移的必經(jīng)步驟,因此在外周血中檢測到腫瘤細胞預示著有發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移的可能。

近些年來,對于癌癥病人血液中CTCs的計數(shù)已逐漸用于癌癥治療的療效評估。如果能對CTCs進行基因組分析將有助于我們更好地了解腫瘤轉(zhuǎn)移的生物學機制;同時,作為一種非侵襲性的檢測手段,CTCs的基因組分析還可以為療效評價、預后判斷以及個體化治療提供及時可靠的依據(jù)。然而,由于循環(huán)腫瘤細胞在病人外周血中存在的數(shù)量極其,對其進行基因組測序具有較大難度。

在此項研究中,研究人員使用了哈佛大學謝曉亮組發(fā)明的多重退火和環(huán)化循環(huán)的擴增技術(shù)(MALBAC)成功實現(xiàn)了對于來自癌癥病人外周血單個循環(huán)腫瘤細胞的全基因組擴增和深度測序。MALBAC技術(shù)具有基因組擴增均勻,覆蓋率高等眾多優(yōu)勢,從而使得研究人員可以在單個細胞水平準確探測全基因組基因拷貝數(shù)變異(CNVs)和單核苷酸變異(SNVs)。

研究人員重點研究了肺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞的分子特性。在來自眾多肺腺癌患者和小細胞肺癌患者的循環(huán)腫瘤細胞中,成功檢測到與癌癥發(fā)生發(fā)展相關(guān)密切的原癌基因和抑癌基因上的重要單核苷酸變異和插入/缺失。單細胞水平CTCs的基因突變的檢測避免了反復穿刺活檢給病人帶來的傷害和痛苦, 并能及時地提供個體化治療所需的重要信息,例如導致癌癥轉(zhuǎn)移過程中發(fā)生表型轉(zhuǎn)換的重要突變,以及癌癥治療過程中產(chǎn)生耐藥性的重要突變。

研究過程中研究人員意外地發(fā)現(xiàn)來自同一個病人的不同CTC都展現(xiàn)出高度一致的全基因組拷貝數(shù)變化模式,和同一病人的轉(zhuǎn)移位腫瘤組織的拷貝數(shù)變化模式一致。這種現(xiàn)象在肺腺癌和小細胞肺癌的病人中都得到了驗證。此外,在不同的肺腺癌病人中,CTC展現(xiàn)的全基因組拷貝數(shù)變化模式具有高度的相似性。腫瘤的異質(zhì)性以來被當作是惡性腫瘤的重要特征。 在CTC中觀察到的高度一致的拷貝數(shù)變異模式將會改變傳統(tǒng)上對腫瘤異質(zhì)性的理解,揭示了特定的拷貝數(shù)變異在腫瘤形成及轉(zhuǎn)移中發(fā)揮了重要的作用。

進一步研究發(fā)現(xiàn),小細胞肺癌患者的拷貝數(shù)變異模式與那些肺腺癌患者明顯不同,展現(xiàn)出癌種之間一定的特異性。這種特異性可能跟腫瘤發(fā)展、轉(zhuǎn)移所處的微環(huán)境相關(guān)。這項發(fā)現(xiàn)為將來基于CTC拷貝數(shù)變異來進行癌癥病人分型提供了理論基礎(chǔ)。

北京大學生物動態(tài)光學成像中心白凡副研究員、中心主任謝曉亮教授以及腫瘤醫(yī)院王潔教授及為該論文的共同通訊作者。倪曉暉博士和在讀研究生蘇哲、高妍是這篇論文的并列*作者。該項研究得到了北京大學985臨床醫(yī)院合作專項經(jīng)費、青年科研啟動經(jīng)費以及國家杰出青年基金的支持。

網(wǎng)友稱單細胞測序技術(shù)應用于癌癥診斷,新一代的技術(shù),人類的福音!

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(來源:科學網(wǎng))

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