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人血管生成素1（ANG-1）ELISA酶免試劑盒

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上海瑞齊生物科技有限公司

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產品簡介

提供人血管生成素1(ANG-1)ELISA酶免試劑盒，Human Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA酶免試劑盒，您可以選擇進口原裝96T和進口分裝48T和96T elisa酶免試劑盒。48T可以檢測46個標本，96T可以檢測92個標本并提供免費代測服務。同時為您提供細胞凋亡檢測，化學發光檢測，免疫學及分子生物學試劑
細胞因子等數萬種試劑。

詳細介紹

產品名稱：人血管生成素1（ANG-1）ELISA酶免試劑盒
英文名稱：Human Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA酶免試劑盒
規格：48T/96T
檢測標本：用于ELISA測定的臨床標本zui為常用的是血清（漿），有時因為特定的檢測目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。

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，Human Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA酶免試劑盒
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，Human Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA酶免試劑盒 專業供應。

相關知識：
ELISA設計：ELISA測定的實驗設計主要涉及到抗體或抗原的使用濃度、溫育溫度、溫育時間、測定模式是采用競爭抑制或雙夾心直接測定，以及雙夾心測定是采用一步還是兩步法等，其對測定的影響主要是試驗的測定下限、特異性和簡便性等。
試劑準備
1、使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫（18-25 ），試劑不能直接在37 溶解。
2、標準品（凍干品）：每瓶標準品用標準品稀釋液稀釋至1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為4,000 pg/mL（貯液）。先將其稀釋為
2,000 pg/mL（標準曲線zui高濃度）后，再準備7 個稀釋標準品的EP 管，每個EP 管中加入500 的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成2,000 pg/mL，1,000 pg/mL，500 pg/mL，250 pg/mL，125 pg/mL，62.5 pg/mL，31.2 pg/mL，標準品稀釋液（0pg/mL）直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。Tube 1 2 3 4 5 6 7 8 9pg/mL 4,000 2,000 1,000 500 250 125 62.5 31.2 0
3、標本：血清或血漿標本*稀釋大約10-100倍，標本使用0.02 M 的PBS 稀釋（ PH=7.0-7.2）。
4、檢測稀釋液A 及檢測稀釋液B：用6mL 蒸餾水或去離子水將6mL 濃檢測液A 及B稀釋至12mL，進行2 倍稀釋，稀釋后的工作液不宜進行冷凍保存。
5、檢測溶液A 及檢測溶液B：Detection A 及Detection B 在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。臨用前分別以檢測稀釋液A或B 1:100稀釋（如：10 檢測溶液A / 990 檢測稀釋液A），充分混勻，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（100 /孔），實際配制時應多配制0.1-0.2mL。
6、濃洗滌液：用580mL 蒸餾水或去離子水將20mL 濃洗滌液稀釋至600mL，進行30稀釋。
7、底物溶液：請用滅菌的移液器吸頭吸取所需體積的TMB 至另一干凈容器中使用，容器中剩余的底物應予丟棄，不要倒回TMB 瓶中。
注意：
1、標準品請于臨用前15 分鐘內配制。該標準品只能使用一次。
2、標準品的稀釋不能直接在板中進行。
3、標準品、檢測溶液A 工作液、檢測溶液B 工作液請使用相應的稀釋液配制，不能混淆。混勻時要輕輕充分混勻，避免起泡。為保證實驗結果的準確請使用微量吸管，并校準微量加液器。請依據所需的量精確配制，盡量不要微量配制（如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10 ），以避免造成濃度誤差。
4、請勿重復使用已經稀釋過的標準品、檢測溶液A 工作液和檢測溶液B 工作液。
5、濃洗滌液中如有結晶析出，請先溫育至室溫，輕輕混勻，至到結晶*溶解再進行配制。
操作步驟
實驗前應預測標本含量，如果標本濃度過高，應對標本進行稀釋，使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1、加樣：分別設標準孔、待測樣品孔、空白孔。設標準孔7 孔，依次加入100 不同濃度的標準品（見試劑準備2）。空白孔加100 （見試劑準備第二步zui后一管），余孔加待測樣品100 ，酶標板加上覆膜，37 溫育2 小時。
2、棄去液體，甩干，不用洗滌。
3、每孔加檢測溶液A 工作液100 （臨用前配制），酶標板加上覆膜，37 溫育1 小時。
4、棄去孔內液體，每孔用350 的洗滌液洗滌，浸泡1-2 分鐘，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干），重復洗板3 次。zui后一次洗滌后，要把孔內的洗滌液*甩干。
5、每孔加檢測溶液B 工作液（臨用前配制）100 ，加上覆膜，37 溫育30 分鐘。
6、棄去孔內液體，甩干，洗板5 次，方法同步驟4。
7、每孔加底物溶液90 ，酶標板加上覆膜，37 避光顯色（反應時間控制在15-25 分鐘，不要超過30 分鐘。當標準孔的前3-4 孔有明顯的梯度藍色，后3-4 孔梯度不明顯時，即可終止）。
8、每孔加終止溶液50 ，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物溶液的加入順序相同。如出現顏色不勻一，請輕輕晃動酶標板以使溶液混合均勻。
9、在確保酶標板底無水滴及孔內無氣泡后，立即用酶標儀在450nm 波長測量各孔的光密度（值）。
注