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規格 | 5×105Cells/T25培養瓶 | 組織來源 | 骨骼肌組織 |
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貨號 | CS-X3294 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
細胞保存方法:
(一)細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;
2. 取對數生長期的細胞,去除舊培養液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內。
產品信息:
貨號 | CS-X3294 | 組織來源 | 骨骼肌組織 |
傳代特性 | 可傳1-3代左右 | 培養基 | 含FBS、馬血清、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養條件 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產品名稱:小鼠骨骼肌衛星細胞 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 小鼠骨骼肌衛星細胞分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態、結構和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經支配下收縮或舒張,進行隨意運動。肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方。肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區段,叫做一個肌節。肌衛星細胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維(肌細胞)外的一種扁平、有突起的細胞。著于肌纖維(肌細胞)表面;當肌纖維(肌細胞)受損后,肌衛星細胞可增殖分化,參與肌纖維(肌細胞)的修復,因此具有干細胞性質。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的小鼠骨骼肌衛星細胞采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結合多次差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 公司實驗室分離的小鼠骨骼肌衛星細胞經Desmin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件 PLL(0.1mg/ml) 培養基 含FBS、馬血清、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣 傳代特性 可傳1-3代左右 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基,使細胞處于指數生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養之細胞,用加血清的培養基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態,約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質,應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。
2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。
3)、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產品:
小鼠口腔粘膜成纖維細胞 | 人端粒保護蛋白1(POT1)檢測試劑盒 |
人睪丸支持細胞 | 人蛋白mei3特異性抗中性粒細胞胞質抗體(PR3-ANCA)檢測試劑盒 |
小鼠腎動脈內皮細胞 | 人超磷suan化微管相關蛋白tau(hyper phosphorylated MAPT)試劑盒ELISA |
大鼠腎動脈內皮細胞 | 人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)試劑盒 ELISA |
人腎小球內皮細胞 | 禽白血病病毒I亞群RT-PCR試劑盒 |
小鼠腎動脈平滑肌細胞 | 球孢子菌通用PCR檢測試劑盒 |
大鼠腎動脈平滑肌細胞 | 高致病性豬藍耳病病毒(PRRSV-M)核suan檢測試劑盒 |
小鼠腎小管上皮細胞 | 壞死梭桿菌PCR檢測試劑盒 |
大鼠腎小管上皮細胞 | 馬毛癬菌PCR試劑盒 |
人腎皮質上皮細胞 | 禽白血病病毒D亞群RT-PCR試劑盒,停 |
小鼠腎小球內皮細胞 | 茄病鐮刀菌PCR試劑盒 |
小鼠前列腺上皮細胞 | 馬蘇哈魚病毒PCR檢測試劑盒 |
大鼠腎小球內皮細胞 | 小鼠骨骼肌衛星細胞馬流感病毒(EIV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
大鼠前列腺上皮細胞 | 腔闊盤吸蟲PCR檢測試劑盒 |
人輸尿管上皮細胞 | 斑節對蝦桿狀病毒(MBV)核suan檢測試劑盒 |
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