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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	胸腺組織
貨號	CS-X3334	細胞形態(tài)	上皮細胞樣

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X3334	組織來源	胸腺組織
傳代特性	可傳1-2代	培養(yǎng)基	含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細胞形態(tài)	上皮細胞樣	生長特性	貼壁
培養(yǎng)條件		換液頻率	每2-3天換液一次

人胸腺上皮細胞

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：人胸腺上皮細胞
2.組織來源：胸腺組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

人胸腺上皮細胞分離自胸腺組織；胸腺是機體重要的淋巴器官，其功能與免疫緊密相關(guān)，是T細胞分化、發(fā)育、成熟的場所，還可以分泌胸腺激素及激素類物質(zhì)，具有內(nèi)分泌技能的器官。胸腺上皮細胞和胸腺細胞是胸腺微環(huán)境的重要組成部分，其外，胸腺上皮細胞組成了胸腺細胞不同發(fā)育階段的三維結(jié)構(gòu)，根據(jù)其在胸腺中位置不同，可分為皮質(zhì)胸腺上皮細胞和髓質(zhì)胸腺上皮細胞。胸腺細胞的發(fā)育和成熟是通過在胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)上皮細胞的遷移過程中相互作用完成的。此外，胸腺細胞通過皮質(zhì)胸腺上皮細胞介導(dǎo)的陽性選擇和髓質(zhì)胸腺上皮細胞介導(dǎo)的陰性選擇發(fā)育為能夠識別和耐受自身主要組織相容復(fù)合體和自身抗原的成熟T淋巴細胞。胸腺上皮細胞是構(gòu)成胸腺微環(huán)境的主要成份，其形態(tài)、分布和功能多樣。表面抗原表達具有高度異質(zhì)性，與胸腺細胞結(jié)合成不同類型復(fù)合體，部分胸腺上皮細胞相互排列構(gòu)成囊泡樣結(jié)構(gòu)。電鏡觀察，可把胸腺上皮細胞分為3-6型，用抗胸腺上皮細胞單克隆抗體熒光染色可把胸腺上皮細胞分為9種類型。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的人胸腺上皮細胞采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人胸腺上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞保存方法：

（一）細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

人胸腺上皮細胞

注意事項：

1）、欲冷凍保存之細胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠腸系膜上動脈內(nèi)皮細胞	人蛋白S(Protein S)試劑盒ELISA
AtT-20 (小鼠垂體瘤細胞)	人α突觸核蛋白(α-SYN)試劑盒ELISA
B16 (小鼠黑色素瘤細胞)	人胞外超氧化物歧化mei(SOD3)ELISA檢測試劑盒
B16-F0 (小鼠黑色素瘤細胞)	人β-黑色su細胞刺激su(β-MSH)檢測試劑盒
B16-F1 (小鼠黑色素瘤細胞)	諾如病毒通用RT-PCR試劑盒
B16-F10 (小鼠皮膚黑色素瘤細胞)	鯉皰疹病2型PCR檢測試劑盒
B82 (小鼠腫瘤細胞系)	沙門氏菌SPP-spy核suan檢測試劑盒
B95-8 (絨猴EB病毒轉(zhuǎn)化的白細胞)	口腔變形鏈球菌PCR檢測試劑盒
BALB/3T3 clone A31 (小鼠胚胎成纖維細胞)	貓白血病病毒RT-PCR試劑盒
BC-009 (人乳腺癌細胞)	普雷沃菌屬通用PCR試劑盒
BC-019 (人乳腺癌細胞)	破傷風(fēng)梭狀芽孢桿菌PCR試劑盒
BC-021 (人乳腺癌細胞)	貓細小病毒PCR檢測試劑盒
BC-020 (人乳腺癌細胞)	人胸腺上皮細胞曼那角病毒PCR檢測試劑盒
BC-022 (人乳腺癌細胞)	皮諾卡菌PCR試劑盒
BC3H1 (小鼠腦瘤細胞)	呼吸道合胞病毒B 型（RSV-B）核suan檢測試劑盒

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。