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| 規格 | 5×105Cells/T25培養瓶 | 組織來源 | 腦組織 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CS-X3374 | 細胞形態 | 神經元細胞樣 |
產品信息：
貨號 | CS-X3374 | 組織來源 | 腦組織 |
傳代特性 | 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群 | 培養基 | 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態 | 神經元細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養條件 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹：
產品名稱：大鼠下丘腦神經元細胞 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 大鼠下丘腦神經元細胞分離自下丘腦；下丘腦又稱丘腦下部，位于大腦腹面、丘腦的下方，是調節內臟活動和內分泌活動的較高級神經中樞所在。下丘腦自前向后可分三部﹐即前部（又名視前區和視上區）﹑中部（結節區）和后部（乳頭體區）。下丘腦具有許多細胞核團和纖維束﹐與中樞神經系統的其它部位具有密切的相互聯系。它不僅通過神經和血管途徑調節腦垂體前﹑后葉激素的分泌和釋放﹐而且還參與調節自主神經系統﹐如控制水鹽代謝﹑調節體溫﹑攝食﹑睡眠﹑生殖、內臟活動以及情緒等。下丘腦神經元與來自其他部位的神經纖維有廣泛的突觸聯系，可以接受很多神經沖動，為內分泌系統和神經系統的中心。它們能調節垂體前葉功能，合成神經垂體激素及控制自主神經和植物神經功能。故提取下丘腦神經元進行體外培養，建立下丘腦神經元體外實驗平臺具有重要意義。 5.方法簡介： 公司實驗室分離的大鼠下丘腦神經元細胞采用yi蛋白酶消化法結合神經元專用培養基培養、化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。 6.質量檢測： 公司實驗室分離的大鼠下丘腦神經元細胞經β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 包被條件 PLL（0.1mg/ml） 培養基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 神經元細胞樣 傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% |
細胞保存方法：
（一）細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養液；
2. 取對數生長期的細胞，去除舊培養液，用PBS清洗。
3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養皿表面）把單層生長的細胞消化下來；
4. 離心1000rpm，5min；
5. 去除，加入適量配制好的凍存培養液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；
6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；
7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；
8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內。
注意事項：
1）、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質，應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。
2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。
3）、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產品：
NK細胞 | 人程序性死亡因子配體1(PD-L1/CD274)ELISA檢測試劑盒 |
U14 (小鼠子宮頸癌細胞) | 人胎球蛋白A(FETU-A)檢測試劑盒 |
U-2 OS [U2OS] (人骨肉瘤細胞) | 人白介su-1β前體(Pro-IL-1β)檢測試劑盒 |
U251 (人膠質瘤細胞) | 人γ谷氨酰轉移mei(GGT) ELISA Kit |
U266 (人多發性骨髓瘤細胞) | 人免疫缺陷病毒1型M群B型RT-PCR試劑盒 |
U-87 MG (人腦星形膠質母細胞瘤細胞) | 同艾特韋病毒PCR檢測試劑盒 |
U-937 (人組織細胞淋巴瘤細胞) | 馬源性成分(Horse)核suan檢測試劑盒 |
UACC-812 (人乳腺導管瘤細胞) | 貓衣原體PCR檢測試劑盒 |
UMNSAH/DF-1 (雞胚成纖維細胞) | 梅毒螺旋體梅毒亞種PCR試劑盒 |
UMR-106 (大鼠骨肉瘤細胞) | 帕臘南病毒RT-PCR試劑盒 |
UM-UC-3 (人膀胱移行細胞癌) | 瘧原蟲PCR檢測試劑盒 |
V79 (倉鼠肺細胞) | 蜜蜂球囊菌PCR檢測試劑盒 |
USMC (大鼠血管平滑肌細胞) | 大鼠下丘腦神經元細胞梅毒螺旋體PCR檢測試劑盒 |
VCaP (人前列腺癌細胞) | 牛支原體（MYPB）PCR檢測試劑盒（熒光-PCR法） |
VE (人血管內皮細胞) | 大豆內源基因Lectin核suan檢測試劑盒 |
操作步驟：
1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基，使細胞處于指數生長期。
2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。
3）、離心收集培養之細胞，用加血清的培養基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。
4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。
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