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規格 | 5×105Cells/T25培養瓶 | 組織來源 | 胎盤組織 |
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貨號 | CS-X3388 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
產品信息:
貨號 | CS-X3388 | 組織來源 | 胎盤組織 |
傳代特性 | 可傳5代左右;3代以內狀態 | 培養基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產品名稱:大鼠胎盤間充質干細胞 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 大鼠胎盤間充質干細胞細胞分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育,依靠胎盤從母體取得營養,而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合,以達到母子間物質的交換,這樣的結構稱假胎盤。胎盤間充質干細胞(mesenchymal stem cell,MSC)是一種多能干細胞,是具有自我復制能力的多潛能細胞。在一定條件下,它可以分化成多種功能細胞像APSC多能細胞。在胚胎發育中來源于中胚層。在機體正常的組織損傷修復過程中,MSC是一種重要的參與組織再生的細胞庫。在組織損傷引起的特殊信號作用下,MSC遷移到受損部位,在局部聚集增殖,依據不同的損傷信號沿著不同途徑分化。MSC易于分離擴增,體外倍增能力旺盛,能保持其多向分化能力。因此,MSC是一種實用的組織修復種子細胞。相較于其他干細胞,胎盤間充質干細胞具有來源方便,細胞數量充足,易于分離、培養、擴增和純化,傳代擴增多代后仍具有干細胞特性。胎盤是干細胞的佳來源。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的大鼠胎盤間充質干細胞采用yi蛋白酶-膠原酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 公司實驗室分離的大鼠胎盤間充質干細胞經CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣 傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態佳 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞保存方法:
(一)細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;
2. 取對數生長期的細胞,去除舊培養液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態,約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質,應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。
2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。
3)、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產品:
293FT (人胚腎細胞) | 人巢蛋白1(NID1)檢測試劑盒 |
大鼠膀胱平滑肌細胞 | 人新生兒促甲狀腺su(N-TSH)檢測試劑盒 |
大鼠膀胱移行上皮細胞 | 人白喉抗體(Diphtheria Ab)試劑盒ELISA |
大鼠胚肺成纖維細胞 | 人癌基因蛋白質p190/bcr-abl ELISA檢測試劑盒 |
大鼠胚胎成纖維細胞 | 洋蔥伯克氏菌PCR試劑盒 |
大鼠胚胎肝母細胞 | 腦心肌炎病毒PCR檢測試劑盒 |
大鼠胚胎干細胞 | 鴨源性成分Co基因(Duck-Co)檢測試劑盒 |
大鼠胚胎肢芽間充質干細胞 | 難辨梭狀芽胞桿菌PCR檢測試劑盒 |
大鼠皮層神經元細胞 | 孟氏尖旋線蟲PCR試劑盒 |
大鼠破骨細胞 | 諾沃克病毒RT-PCR試劑盒 |
大鼠浦肯野細胞 | 牛仰口線蟲PCR試劑盒 |
大鼠臍靜脈內皮細胞 | 綿羊痘病毒PCR檢測試劑盒 |
大鼠臍帶間充質干細胞 | 大鼠胎盤間充質干細胞美洲四棱線蟲PCR試劑盒 |
大鼠臍靜脈平滑肌細胞 | 牛型放線菌PCR試劑盒 |
大鼠氣管平滑肌細胞 | 豬圓環病毒/偽狂犬病毒(PCV/PRV)核suan檢測試劑盒 |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基,使細胞處于指數生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養之細胞,用加血清的培養基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。
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