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上海莼試生物技術有限公司
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小鼠骨髓單個核細胞

參  考  價:900 - 3800 /瓶
具體成交價以合同協議為準
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    上海市

更新時間:2024-07-26 16:09:17瀏覽次數:288次

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規格 5×105Cells/T25培養瓶 組織來源 骨髓
貨號 CS-X3412 細胞形態 圓形
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細胞保存方法:

(一)細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;

2. 取對數生長期的細胞,去除舊培養液,用PBS清洗。

3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來;

4. 離心1000rpm,5min;

5. 去除,加入適量配制好的凍存培養液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;

6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;

7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;

8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內。

產品信息:

貨號

CS-X3412

組織來源

骨髓

傳代特性

不增殖;不傳代

培養基

FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

細胞形態

圓形

生長特性

半貼壁半懸浮

培養條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

換液頻率

2-3天換液一次

商品介紹:

產品名稱:小鼠骨髓單個核細胞
2.組織來源:骨髓

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

小鼠骨髓單個核細胞分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個核細胞是骨髓中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。注意這里是(mononuclear cell)單個核細胞,而不是(Monocyte)單核細胞。單個核細胞的體積、形態和比重與骨髓其他細胞不同,利用一定比例聚蔗糖和泛影鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心,使一定密度的細胞按相應密度梯度分布,可將各種血細胞與單個核細胞分離。

5.方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠骨髓單個核細胞采用取骨髓、通過密度梯度離心法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

公司實驗室分離的小鼠骨髓單個核細胞經過檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 半貼壁半懸浮

細胞形態 圓形

傳代特性 不增殖;不傳代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠骨髓單個核細胞

小鼠骨髓單個核細胞



操作步驟:

1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基,使細胞處于指數生長期。

2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。

3)、離心收集培養之細胞,用加血清的培養基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。

4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。

注意事項:

1)、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態,約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質,應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。

2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。

3)、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。

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