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上海莼試生物技術有限公司
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大鼠髖臼軟骨細胞

參  考  價:900 - 3800 /瓶
具體成交價以合同協議為準
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    代理商

  • 所在地

    上海市

更新時間:2024-07-26 16:07:12瀏覽次數:237次

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規格 5×105Cells/T25培養瓶 組織來源 軟骨組織
貨號 CS-X3417 細胞形態 梭形、多角形
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細胞保存方法:

(一)細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;

2. 取對數生長期的細胞,去除舊培養液,用PBS清洗。

3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來;

4. 離心1000rpm,5min;

5. 去除,加入適量配制好的凍存培養液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;

6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;

7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;

8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內。

產品信息:

貨號

CS-X3417

組織來源

軟骨組織

傳代特性

可傳3代左右

培養基

FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

細胞形態

梭形、多角形

生長特性

貼壁

培養條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

換液頻率

2-3天換液一次;

商品介紹:

產品名稱:大鼠髖臼軟骨細胞
2.組織來源:軟骨組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠髖臼軟骨細胞分離自髖關節軟骨組織,髖關節是人體大、穩定的關節之一,是典型的球臼關節。髖關節既具有良好的內在穩定性,也具有靈活的活動性。髖臼位于髖骨外側面中央,呈半球形深凹,直徑約30~50mm,表面覆蓋厚約2mm的透明關節軟骨,呈半月形分布。中央是髖臼窩,無軟骨覆蓋,由哈佛腺充填,可以隨關節內壓力的增減擠出或者吸入關節液,以維持關節內壓力的平衡。髖臼邊緣的環形關節盂唇可以加深、加寬髖臼,使髖臼容納股骨頭的大部并處于穩定的位置,加強了髖關節的穩定性。幼稚的關節軟骨細胞位于關節軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與關節軟骨表面平行,越向深層的關節軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形、染色淺,細胞質弱嗜堿性,常見數量不一的脂滴。成熟的關節軟骨細胞多2-8個成群分布于關節軟骨陷窩內,這些關節軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,關節軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,關節軟骨細胞收縮為不規則形,在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的關節軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡介:

公司實驗室分離的大鼠髖臼軟骨細胞采用膠原酶聯合中性dan白酶消化制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

6.質量檢測:

公司實驗室分離的大鼠髖臼軟骨細胞Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次;

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形、多角形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠髖臼軟骨細胞

大鼠髖臼軟骨細胞



操作步驟:

1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基,使細胞處于指數生長期。

2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。

3)、離心收集培養之細胞,用加血清的培養基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。

4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。

注意事項:

1)、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態,約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質,應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。

2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。

3)、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。

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